促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）对化疗大鼠卵巢损伤防护作用的研究

论文摘要

随着生命科学的发展,对肿瘤综合治疗模式的开展及运用,肿瘤患者的5年生存率明显提高。由于化疗药物的大量使用,常导致一系列的长短期并发症,临床常见的一个远期并发症是卵巢功能的损害。由于卵巢生殖细胞数量有限,不能再生,常导致卵巢早衰（premature ovarian failure POF）,引起月经不规律、不育、过早绝经或合并潮热、盗汗、骨质疏松及泌尿、心血管系统症状等[1]。早绝经和不育会严重影响年轻患者的生活质量和自信。为了进一步提高患者的生存质量,迫切需要预防化疗药物对卵巢的损害。本实验主要研究化疗药物顺铂对雌性大鼠的卵巢损害、促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）对化疗中大鼠卵巢功能损害的保护作用及机制,以期待为进一步的临床研究提供一定的实验室依据。一. GnRHa对化疗大鼠卵巢功能保护作用观察选用60只2-3月龄、体重（250±10）g的SD雌性大鼠作为实验动物,随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组、环磷酰胺（CTX）组、顺铂（DDP）组、GnRHa组、GnRHa+CTX组及GnRHa+DDP组。所有实验大鼠通过腹腔注射给药,连续20天。所有动物用药结束后于间情期将大鼠处死,观察指标包括体重,大鼠卵巢、子宫湿重和形态学变化,采用放射免疫方法测定大鼠血清中E2、FSH的水平。运用光镜观察卵巢组织结构的变化,计数各级卵泡及总卵泡数目。结果表明:1.给药后各组体质量有显著差异,注射20mg/（kg·d）DDP组大鼠与空白对照组大鼠相比体重明显减轻（P<0.05）,GnRHa组与正常对照组未见显著差异（P>0.05）;2.DDP组大鼠各期卵泡数都显著减少（P<0.05）,卵巢皮质增厚、结构混乱、间质纤维化,细胞呈退行性变化,血管减少。GnRHa组生长卵泡和成熟卵泡显著减少,而保存了大部分初级卵泡,少量闭锁卵泡,无组织纤维化。GnRHa+DDP组可见初级卵泡比例增多（P<0.05）,少见成熟、生长卵泡,组织纤维化程度较DDP组减轻,无明显出血、坏死;3.DDP组血清FSH水平明显升高、E2水平下降（P<0.05）,而GnRHa+DDP组与空白对照组未见显著差异（P>0.05）,这也说明DDP对卵巢功能有明显损伤,而先期应用GnRHa后,对卵巢起到了保护作用。二.GnRHa对化疗大鼠卵巢功能保护的作用机制研究实验分组同第一部分。采用Tunel原位细胞凋亡法观察各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率;采用免疫组织化学（SP）法检测各组大鼠卵巢组织颗粒细胞Bcl-2、Caspase-3的表达情况;免疫组织化学（SP）法观察雌激素受体（ERβ）和孕激素受体（PR）在各组大鼠卵巢组织中的表达。结果显示, DDP组凋亡细胞率明显高于空白对照组及GnRHa+DDP组（P<0.05）;DDP组与GnRHa+DDP组相比Bcl-2表达降低,Caspase-3表达升高;各组间ERβ、PR的表达水平未见显著差异（P>0.05）。结论:GnRHa+DDP组可通过上调Bcl-2的水平、降低Caspase-3表达,来发挥抑制凋亡的作用。GnRHa对化疗大鼠卵巢功能保护可能与ERβ、PR无关。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 第一部分 促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）对化疗雌性大鼠卵巢功能的保护作用
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 统计学处理
• 4 结果
• 5 讨论
• 第二部分 促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）对化疗大鼠卵巢损伤的保护机制的研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 统计学处理
• 4 结果
• 5 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢