论文摘要
越来越多的研究表明血管内皮生长因子（VEGF）及其受体参与白血病的发病及预后,以VEGF为靶点在白血病治疗中的作用受到人们的重视。可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt-1）是VEGF受体拮抗剂,可特异性与VEGF结合抑制VEGF对白血病细胞及血管内皮细胞的增殖。我们的实验目的是通过转基因技术将sFlt-1的第1-4个Ig样环（以下简称sFlt-1D4） 的cDNA转染骨髓基质细胞,得到sFlt-1D4的稳定表达,为下一步的动物实验做准备。我们首先扩增sFlt-1D4并构建sFlt-1D4的真核表达载体,再将载体转染骨髓基质细胞,最后检测蛋白表达情况。实验结果表明,在转染后24 小时即出现蛋白分泌,48小时达到高峰,4周仍有稳定表达。转基因产生的sFlt-1D4蛋白具有抑制K562 细胞增殖的作用,ELISA 还证明转基因细胞的培养上清使K562 细胞培养上清中的VEGF 含量减少。本研究论证了通过转基因技术可以获得有活性的sFlt-1D4的蛋白表达,为下一步的动物实验打下了基础。
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