益筋方治疗重症肌无力的实验研究

论文摘要

目的:探讨温肾活血、益气升清的益筋方对实验性自身免疫性重症肌无力小鼠的治疗机理。方法:用重症肌无力病人的血清被动免疫小鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力模型,针对MG的基本病机是脾肾阳虚兼有血瘀组成益筋方,用益筋方、强的松给小鼠灌胃21天,处死动物。利用流式细胞技术和免疫组织化学方法,分别以T细胞及其亚群为指标,观察益筋方、强的松对EAMG细胞免疫的影响;以IL-2、IL-6、TNF-α为指标,观察益筋方对EAMG细胞因子的影响;通过检测胸腺细胞Bcl-2的表达,观察益筋方对EAMG胸腺的影响。结果:强的松、益筋方均能升高CD3+,降低CD4+/CD8+比值;降低IL-2,降低胸腺Bcl-2表达;对IL-6影响不明显;可升高TNF。结论:益筋方能改善EAMG的肌无力症状,通过影响T细胞和其亚群及细胞因子,调控细胞免疫和体液免疫,起到治疗MG的作用。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 益筋方治疗重症肌无力的理论依据
• 一、重症肌无力的发病机制
• （一） 相关抗体
• （二） T 细胞及其亚群
• （三） 细胞因子
• （四） 胸腺及BCL-2
• （五） 遗传因素
• 二、重症肌无力的治疗现状
• （一） 胆碱酯酶抑制剂
• （二） 肾上腺糖皮质激素
• （三） 细胞毒制剂
• （四） 胸腺摘除术
• （五） 丙种球蛋白静脉注射
• （六） 血浆交换
• （七） 特异性免疫治疗
• 三、祖国医学对重症肌无力的认识
• （一） 祖国医学对痿病的认识
• （二） 脾肾亏虚是重症肌无力的基本病机
• （三） 温肾活血，益气升清是重症肌无力的重要治法
• 四、益筋方的组方依据
• （一） 益筋方的组方原则
• （二） 益筋方组方的药理依据
• 第二部分 实验研究
• 实验一 实验性自身免疫性重症肌无力小鼠模型的制备
• 一、实验材料
• （一） 实验动物及饲料
• （二） 实验器材
• 二、实验方法
• （一） 血清收集
• （二） 动物分组及模型制作
• （三） 观察指标
• 三、实验结果
• 四、讨论
• 实验二 益筋方对EAMG 小鼠肌无力及体重的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验器材
• 二、实验方法
• 三、统计方法
• （一） 肌力评分
• （二） 体重
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 实验三 益筋方对EAMG 小鼠T 细胞亚群的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验试剂及仪器
• 二、实验方法
• （一） 治疗和取血
• （二） T 细胞及其亚群测试
• 三、统计方法
• +'>（一） CD3⁺
• +'>（二） CD4⁺
• +'>（三） CD8⁺
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 实验四 益筋方对EAMG 小鼠IL-6 的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验试剂及仪器
• 二、实验方法
• （一） 治疗和取血同实验三
• （二） IL-6 测试
• 三、统计方法
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 实验五 益筋方对 EAMG 小鼠 TNF-α 的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验试剂及仪器
• 二、实验方法
• （一） 治疗和取血同实验三
• （二） TNF-α 测试
• 三、统计方法
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 实验六 益筋方对EAMG 小鼠IL-2 的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验试剂及仪器
• 二、实验方法
• （一） 治疗和取血同实验三
• （二） IL-2 测试
• 三、统计方法
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 实验七 益筋方对 EAMG 小鼠肌肉、胸腺及其 Bcl-2 表达的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验试剂及仪器
• 二、实验方法
• （一） 治疗与处死动物
• （二） 取腓肠肌、胸腺及病理观察
• （三） 免疫组化染色
• （四） BCL-2 观察
• 三、统计方法
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 参考文献
• 综述
• 附录
• 致谢
• 详细摘要