瑞香狼毒对稻瘟病菌的抑制活性及其机理的初步研究

论文摘要

本文研究了瑞香狼毒活性成分对稻瘟病菌的抑制作用，筛选出乙酸乙酯抑菌活性最强，将其过硅胶柱，根据极性强弱依次加入洗脱剂，将极性相同组分合并，分段分离获得Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ四段，测定每一段对稻瘟病菌的抑制活性。实验结果表明：在乙酸乙酯萃取物分段分离的各组分中，各段组分对稻瘟病菌的抑制活性顺序是：Ⅲ＞Ⅳ＞Ⅱ＞Ⅰ，其中Ⅲ段在1.313mg／ml处理后的第8天抑制率达到100％。而第Ⅰ段的抑制效果最差，在1.313 mg／ml处理稻瘟病菌后的第8天其抑制率仅为9.92％。可见瑞香狼毒对稻瘟病菌的抑制活性成分主要分布在第Ⅲ段即中性偏极性一段中。为了进一步研究乙酸乙酯萃取物对稻瘟病菌的抑菌机理，本文研究了乙酸乙酯萃取物对稻瘟病菌孢子的萌发、产孢量的抑制作用和药物处理稻瘟病后其菌丝孢子形态结构的变化，结果显示在1.750 mg／ml，12 h处理下对孢子萌发的抑制率达100％，在2.016 mg／ml处理下对产孢量的抑制率为95.20％，最后将乙酸乙酯Ⅲ段组分在0.6560 mg／ml下处理稻瘟病菌，在倒置显微镜下观察到未加药处理的菌丝生长整齐，原生质体均匀，孢子横隔明显；处理组菌丝发生了变形扭曲，出现空管，孢子横隔消失，且表面有疱疹状突起；在透射电镜下观察到正常组和处理组的细胞壁，细胞膜结构均完整，正常细胞有均匀的细胞质和完整的细胞器，而处理组出现细胞质凝集，质壁分离，线粒体消失，细胞器大量降解的现象。综上所述，瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物对稻瘟病菌具有较强的抑制作用，且抑菌的活性成分主要分布在中性偏极性一段，其抑菌的机理初步推测主要是瑞香狼毒活性成分通过渗透方式而非破坏细胞壁和细胞膜的方式进入细胞，破坏线粒体，降解细胞器，导致细胞不能正常生长代谢，进而抑制了菌丝生长，孢子的萌发和生长。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 瑞香狼毒对稻瘟病菌的抑制活性研究
• 1 材料
• 1.1 供试植物样品
• 1.2 供试药品及试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 供试菌株
• 1.5 培养基
• 2 实验方法
• 2.1 瑞香狼毒各萃取物对稻瘟病菌的活性测定
• 2.2 瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物对稻瘟病菌抑制规律的测定
• 2.3 瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物分段分离对稻瘟病菌的抑制活性测定
• 3 实验结果
• 3.1 瑞香狼毒各萃取物对稻瘟病菌的活性测定
• 3.2 瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物对稻瘟病菌抑制规律的测定
• 3.3 瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物分段分离对稻瘟病菌的抑制活性测定
• 4 讨论
• 4.1 瑞香狼毒粗提物溶剂的选择
• 4.2 瑞香狼毒中活性成分分离方法的选择
• 4.3 抑菌活性方法选择
• 4.4 瑞香狼毒的应用前景
• 第二部分 瑞香狼毒对稻瘟病菌抑制机理的研究
• 1 材料
• 1.1 供试样品
• 1.2 供试药品及试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 供试菌种
• 1.5 培养基
• 2 实验方法
• 2.1 瑞香狼毒对稻瘟病菌孢子萌发和产孢量的影响
• 2.2 瑞香狼毒对稻瘟病菌的形态及细胞结构的影响
• 3 实验结果
• 3.1 瑞香狼毒对稻瘟病菌孢子萌发和产孢量的影响
• 3.2 瑞香狼毒对稻瘟病菌的形态及细胞结构的影响
• 4 讨论分析
• 4.1 稻瘟病菌的浸染机制
• 4.2 对稻瘟病菌用药处理方法的选择
• 4.3 瑞香狼毒对稻瘟病菌抑制机理研究方法的探讨
• 总结
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 硕士期间发表或已接收的论文
• 致谢