上皮性卵巢癌病人血清和肿瘤组织中KLK6、KLK8的表达及临床意义

论文摘要

目的:卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤,其发病隐匿,进展迅速,70%～80%的卵巢癌病人发现时已为晚期,其5年生存率仅为20%～30%,主要原因是早期卵巢癌没有症状,病人难以早期就诊,因此上皮性卵巢癌的早期诊断成为丞待解决的课题。本研究通过检测激肽释放酶基因6（Kallikrein Gene 6,KLK6）、激肽释放酶基因8（Kallikrein Gene 8,KLK8）在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌组织中及血清中的表达水平,探讨KLK6、KLK8在卵巢癌发生和侵袭中的作用,以及作为肿瘤标记物,与CA125比较,用于卵巢癌早期诊断及术后随访的价值,为卵巢癌的药物治疗提供科学的实验依据。方法:1免疫组织化法检测上皮性卵巢肿瘤组织中KLK6、KLK8蛋白的表达水平,其中良性卵巢肿瘤20例、交界性卵巢肿瘤11例、卵巢癌62例（浆液性囊腺癌33例,粘液性囊腺癌18例,子宫内膜样腺癌11例）并用计算机病理图像分析系统测量其灰度值（A值）,计算平均值进行半定量分析。2比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌KLK6、KLK8阳性表达情况,以及KLK6及KLK8在卵巢癌组织中的阳性表达率与不同临床病理特征的关系。3酶联免疫吸附（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）双抗体夹心法检测血清激肽释放酶6（Human Kallikrein 6,hK6）、激肽释放酶8（Human Kallikrein 8,hK8）浓度,各组血清CA125浓度均由本院实验室采用电化学发光法常规测得。4比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人血hK6、hK8、CA125水平。分析卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值与血清浓度值之间的相关性。5根据文献给定的阳性标准,比较血清hK6、hK8、CA125检测用于卵巢癌诊断的敏感度及特异度。6应用SPSS12.0统计软件进行统计学分析,所有计量资料数据均以均数士标准差（x±s）表示,均数的比较采用单因素方差分析,组间均数两两比较采用LSD-t检验。计数资料采用χ2检验,不同组织学类型、临床分期及病理分级表达阳性率的比较采用χ2检验和Fisher精确概率法,卵巢癌组织中A值与血清浓度值之间的相关性采用Spearman等级相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 KLK6在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中表达阳性率分别为15%（3/20）、63.6%（7/11）及61.3%（38/62）,良性卵巢肿瘤组阳性表达率明显低于后两组,差异均有统计学意义（P<0.01）,后两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中的阳性表达率分别为78.8%（26/33）、44.4%（8/18）、36.4%（4/11）,浆液性囊腺癌癌组分别与后两者比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,而后两者间比较,差异无统计学意义（P>0.05,）;早期卵巢癌（Ⅰ、Ⅱ期）组织中表达阳性率（41.7%）,明显低于晚期卵巢癌（Ⅲ、Ⅳ期）组织中表达阳性率（73.1%）（P<0.05）;高分化者阳性率为40%（8/20）,明显低于中、低分化者阳性率71.4%（30/42） （P<0.05）。2 KLK8在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中阳性表达率分别为25%（5/20）、27.3%（3/11）及66.1%（41/62）,卵巢癌组阳性表达率明显高于前两组,差异均有统计学意义（P<0.05）,前两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中,阳性表达率分别为87.9%（29/33）、50%（9/18）、27.3%（3/11）,前者分别与后两者比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,而后两者间比较,差异无统计学意义（P>0.05）;早期卵巢癌（Ⅰ、Ⅱ期）阳性表达率为83.3%（20/24）,明显高于晚期卵巢癌（Ⅲ、Ⅳ期）阳性表达率55.3%（21/38） （P<0.05）;高分化者阳性表达率为85%（17/20）,明显高于中、低分化者阳性表达率57.1%（24/42） （P<0.05）。3在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的血清中,hK6的表达水平分别为3.24±0.19、3.88±0.22、4.49±0.19（μg/L）;hK8表达水平分别为4.26±0.29、5.26±0.46、6.59±0.15（μg/L）;CA125表达水平分别为18.58±16.45、36.22±15.24、146.78±110.62, KLK6、KLK8、CA125表达水平在三组间均有差别,差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。经LSD-t检验两两比较,KLK6在卵巢良性肿瘤组表达水平均低于后两组,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,后两组比较,卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.01）;KLK8卵巢癌组表达水平均高于前两组,差异均有统计学意义（两者均P<0.01）,前两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;CA125在良性肿瘤组表达水平均低于后两组,差异有统计学意义（P<0.05）,后两组比较,卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.05）。4卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值分别为145.2±11.3、156.4±14.7,与血清浓度值之间均呈显著正相关关系, Spearman等级相关系数分别为0.31（P<0.05）、0.608（P<0.001）。5根据给定的阳性标准,hK6、hK8、CA125用于卵巢癌诊断的敏感度分别为66.1%、61.3%、69.4%,特异度分别为83.9%、77.4%、69.4% ,三者敏感度和特异度比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:1卵巢癌组织及血清中存在KLK6、KLK8蛋白表达升高。二者蛋白表达的改变与卵巢癌临床病理分期和恶性度有关,可作为一项监测卵巢癌病人预后的指标。在卵巢癌的进展过程中,KLK6表达升高,提示预后不佳,KLK8表达升高,提示预后良好。2卵巢癌病人血清hK6及hK8水平与卵巢癌组织中KLK6及KLK8的表达水平有关。3 KLK6、KLK8参与上皮性卵巢癌的发生发展过程,血清hK6、hK8与CA125联合检测可指导卵巢癌的早期诊断及判断化疗疗效。4 KLK6、KLK8由于其本身结构、分布与代谢的特殊性,使它们可能成为卵巢癌新的血清学肿瘤标志物,同时为上皮性卵巢癌的靶向治疗提供新的靶点。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 上皮性卵巢癌病人血清和肿瘤组织中 KLK6、KLK8 的表达及临床意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 人组织激肽释放酶6 和8 及 CA125 对卵巢癌诊断及预后的价值
• 致谢
• 个人简历