复方丹参注射液对缺氧-再复氧损伤血管内皮细胞的保护作用

论文摘要

【目的】 探讨复方丹参注射液对缺氧—再复氧损伤的血管内皮细胞的保护作用及其对内皮细胞分泌的一氧化氮（nitric oxide,NO）、总抗氧化能力（total-antioxidation capacity,T-AOC）及细胞间粘附分子—1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）的影响,从而进一步深入探讨丹参的抗动脉粥样硬化机制。 【方法】 本实验采用新生儿脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）体外原代培养方法。将血管内皮细胞分为3组:即①正常组:正常血管内皮细胞;②缺氧-再复氧组:用1mM连二亚硫酸钠处理后再给于完全M199继续培养12h;③丹参组:不同浓度丹参培养12h后再缺氧4h,然后加入完全M199继续培养12h。 通过倒置相差显微镜观察和比较,各组内皮细胞在形态上的变化,用免疫细胞化学染色方法检测ICAM-1在各组内皮细胞中的表达。用MTT法检测细胞吸光度值,利用分光光度计分别测量细胞上清液中的MDA、T-AOC和NO含量。 【结果】 免疫细胞化学检测结果则表明ICAM-1在缺氧—再复氧组的表达非常显著,而正常组和丹参组相似,ICAM-1的表达减弱。另外,MTT比色法结果显示:丹参在（0.25～12.5）mg/ml浓度范围内对缺氧—再复氧后损伤的血官内皮细胞具有保护作用。缺氧—再复氧组的OD值明显降低,而正常组和丹参组的OD值则明显增高,在丹参用药浓度为12.5mg/ml时OD值最高,但其表现浓度依赖关系。正常组（0.473±0.02）、

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 1. 材料
• 1.1 脐静脉内皮细胞
• 1.2 试剂
• 1.3 主要仪器
• 2. 方法
• 2.1 HUVEC的分离及培养
• 2.1.1 HUVEC分离
• 2.1.2 HUVEC的鉴定
• 2.1.3 HUVEC的传代
• 2.2 实验分组及药物处理
• 2.2.1 试验分组
• 2.3 形态学观察
• 2.4 免疫细胞化学染色
• 2.4.1 制作细胞涂片
• 2.4.2 倒置相差显微镜下观察
• 2.5 MTT快速比色法分析
• 2.6 生化学方面观察
• 2.6.1 丙二醛含量测定
• 2.6.2 NO含量测定
• 2.6.3 总抗氧化能力测定
• 2.7 用Excel软件进行统计学处理
• 结果
• 1. 内皮细胞鉴定
• 2. 内皮细胞形态学观察
• 3. 免疫细胞化学染色
• 4. MTT检测结果
• 5. MDA检测结果
• 6. NO检测结果
• 7. T - AOC检测结果
• 讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献