玉米基因差异表达与杂种优势的关系

玉米基因差异表达与杂种优势的关系

论文摘要

玉米是杂种优势表现明显并有巨大经济效益的作物,也是杂种优势遗传学和分子生物学研究的模式植物。许多研究已经表明,在杂种优势形成的过程中,杂交种和亲本之间的基因表达发生了显著的变化。为了更深入地探讨玉米杂种优势形成的分子机理,需要对这些差异表达基因进行研究。本研究的目的是以玉米幼苗期、抽穗期与灌浆期的叶片为实验材料,分析三个不同发育时期杂交种和亲本之间的基因差异表达谱,试图从基因表达的水平探讨杂种优势的生物学基础。利用生产上常用的五个杂交组合农大108(178×黄C),大丰高油330(GY220×Q1261),大丰2号(Q1261×D1815),大丰3号(D1815×950411),沈单16(K12×沈137)为材料,采用mRNA差异显示技术对三个时期的叶片进行了差异显示表达谱的分析,并将差异基因表达模式与12个农艺性状及其中亲优势、超亲优势的关系进行了探讨与研究,取得主要结果如下:1.对玉米幼苗期、抽穗期与灌浆期的叶片,按照差异表达谱对各种差异表达类型与杂种优势的关系进行了探讨,结果表明:1)不同时期,各种差异表达类型在总的差异表达基因片段中所占的比例不同。2)随着生育期的不同,各种差异表达类型所占比例的变化趋势也不尽相同。3)各生育期差异表达基因片段在总的差异表达片段所占的比例不同,这说明各生育期基因差异表达情况有所不同。2.对三个不同时期的四种差异显示模式与12个农艺性状的相关性分析表明:幼苗期的杂种特异表达型(QL1)与行粒数及单亲沉默型(QL3)与穗粗、穗重和穗粒重呈显著(P<0.05)负相关。而且幼苗期的株高、穗位与四个差异显示模式都呈显著(P<0.05)正相关。从差异显示模式与中亲优势的相关性分析看出:幼苗期的差异显示模式与中亲优势没有显著的相关关系;抽穗期的杂种特异表达型(QL1)与穗长呈显著(P<0.05)正相关外,其它几乎没有显著(P<0.05)的关系。与12个农艺性状的超亲优势的相关性分析表明:在幼苗期中杂种特异表达型(QL1)与穗行数、单亲显性表达型(QL2)叶茎夹角呈显著负相关外,双亲沉默型(QL4)与行粒数呈显著(P<0.05)正相关:抽穗期中,单亲沉默型(QL3)与穗粗、茎粗呈显著负相关,而双亲沉默型(QL4)与穗粗、茎粗呈显著(P<0.05)的正相关。3.对三个不同时期差异基因表达片段回收,应用反向Northern技术,对回收的97个差异表达片段进行验证,发现48个差异片段表现明显差异。具体的比例为:杂种偏高亲型(QT2)与杂种偏低亲型(QT3)的差异表达片段在差异表达基因中所占的比例比较大,分别为16和13个,占差异表达基因的33.33%、27.08%;单亲显性表达类型(QL2)为12个,所占的比例也较大,为25%;单亲沉默表达类型(QL3)为6个,占12.5%;双亲沉默表达类型(QL4)为1个,仅占差异表达基因的2.08%;而且我们没有发现表现为杂种特异表达的类型(QL1)。

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 作物杂种优势机理研究进展
  • 1.1.1 杂种优势的发现和利用
  • 1.1.2 经典的杂种优势的遗传机理
  • 1.2 杂种优势的分子生物学基础
  • 1.2.1 基因表达调控与杂种优势
  • 1.2.2 表遗传与杂种优势
  • 1.3 基因差异表达的方法
  • 1.3.1 mRNA差异显示
  • 1.3.2 cDNA扩增片段长度多态性
  • 1.3.3 抑制性差减杂交(SSH)
  • 1.3.4 基因表达的序列分析(SAGE)
  • 1.3.5 cDNA微阵列
  • 1.4 立论依据和研究内容
  • 1.4.1 立论依据
  • 1.4.2 本研究的主要内容
  • 第二章 玉米杂交种及其亲本之间基因差异表达与杂种优势的关系
  • 2.1 前言
  • 2.2 供试材料
  • 2.3 实验方法
  • 2.3.1 差异表达基因片段的展示
  • 2.3.2 总RNA的提取和纯化
  • 2.3.3 所用引物
  • 2.3.4 cDNA的合成和PCR的扩增
  • 2.3.5 片段分离
  • 2.3.6 银染
  • 2.3.7 统计分析
  • 2.3.8 差异基因的回收
  • 2.3.9 回收片段的再扩增
  • 2.4 鉴定与检测
  • 2.4.1 鉴定
  • 2.4.2 差异表达基因片段的检测
  • 第三章 结果与分析
  • 3.1 田间性状调查
  • 3.2 杂交种与其亲本间的基因表达差异
  • 3.3 差异表达类型及其在三个时期的变化规律
  • 3.4 杂交种与其亲本间的基因表达差异的结果与分析
  • 3.5 杂交种与其亲本间的基因差异表达与杂种优势的相关性
  • 3.6 杂交种与其亲本间的基因表达差异鉴定
  • 第四章 讨论
  • 4.1 玉米杂种优势的研究
  • 4.2 mRNA差异显示技术
  • 4.2.1 mRNA差异显示技术存在的问题及改进方法
  • 4.2.2 差异显示技术的改进方法
  • 4.3 差异基因表达与杂种优势
  • 4.3.1 差异基因表达类型与杂种优势的研究
  • 4.3.2 差异基因表达类型与杂种优势的相关性分析
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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