脂肪细胞分化相关因子基因表达在猪生长过程中的变化规律研究

论文摘要

本课题采用半定量RT-PCR法,检测了不同生长阶段杜长大猪（1kg、30kg、50kg、70kg、90kg）皮下脂肪组织中脂肪细胞分化调控转录因子—过氧化物增殖体激动剂受体（PPAγ）、CAATT增强子结合蛋白（C/EBPα）、脂肪细胞确定分化依赖因1（ADD1）和脂肪细胞分化标志性分子—脂蛋白脂酶（LPL）、脂肪细胞脂结合蛋白（AP2）和脂素（adipsin）的mRNA水平,探讨了它们的基因表达随动物体重增加的变化规律,揭示其在脂肪代谢过程中的调控作用。 根据Genebank登陆的PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2,adipsin和内标β-actin基因序列设计引物,分别以皮下脂肪组织RNA为模板,经反转录和PCR,克隆得到了相应的基因片断并进行测序。对测序结果进行序列分析,表明得到的PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2,adipsin和β-actin基因序列与Genebank登陆的相应基因片断（登录号分别为AF103946、U34070、AY307771、AY559454、AF264083、AF012821和AJ312193）同源性分别为99.3%、98.9%、100%、99.6%、99.6%、100%和99.4%。在此基础上,进一步探讨了PCR体系中适宜的退火温度、MgCl2浓度和循环次数,构建了适合于相应基因序列的优化半定量RT-PCR法,用于不同生长阶段猪皮下脂肪组织PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2和adipsin基因mRNA水平的测定。 选取胎次相同,体重为1kg、30kg、50kg、70kg、90kg左右的杜长大母猪各三头,共15头,进行胴体分割试验,测定脂肪率,探讨PPARγ,C/EBPα和ADD1基因表达与体脂沉积的关系。 试验结果表明,猪皮下脂肪组织中PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2和adipsin基因表达均呈现一定的生物学发育规律:①在猪的不同生长阶段（1,30,50,70 and 90kg体重）PPARγ mRNA都被检测到,出生时,PPARγ mRNA水平很低,而后PPARγ基因的表达随着体重的增加而显著增加（P<0.05）,相对表达量从0.15,0.28,0.42,0.72增加到1.05,增加了6倍,其中1kg到30kg体重阶段基因表达量增加幅度最大;②C/EBPα mRNA水平出生时较低,而后随着体重的增加而显著增加（P<0.05）,相对表达量从0.21,0.53,0.89,1.63增加到2.52,增加了11倍,其中1kg到30kg体重阶段基因表达量增加幅度最大;③ADD1 mRNA水平出生

论文目录

• 英文缩写词
• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 脂肪细胞的分化与调控
• 2 PPARγ在糖脂质代谢方面的研究进展
• 3 C／EBPα在糖脂质代谢方面的研究进展
• 4 ADD1在糖脂质代谢方面的研究进展
• 5 研究目的和意义
• 第二章 猪脂肪细胞分化调控转录因子基因表达的研究
• 第一节 不同生长阶段猪PPARγ基因表达的变化规律
• 1 PPARγ基因及内参β-actin基因的克隆
• 1.1 克隆策略
• 1.2 试验材料
• 1.3 试验方法
• 1.4 试验结果
• 1.5 讨论
• 2 不同生长阶段PPARγ基因表达的变化规律
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.3 试验结果
• 2.4 讨论
• 第二节 不同生长阶段猪C／EBPα基因表达的变化规律
• 1 C／EBPα基因的克隆
• 2 不同生长阶段C／EBPα基因表达的变化规律
• 第三节 不同生长阶段猪ADD1基因表达的变化规律
• 1 ADD1基因的克隆
• 2 不同生长阶段ADD1基因表达的变化规律
• 第三章 猪脂肪细胞分化标志分子基因表达的研究
• 第一节 不同生长阶段猪LPL基因表达的变化规律
• 1 LPL基因的克隆
• 2 不同生长阶段LPL基因表达的变化规律
• 第二节 不同生长阶段猪AP2基因表达的变化规律
• 1 AP2基因的克隆
• 2 不同生长阶段AP2基因表达的变化规律
• 第三节 不同生长阶段猪adipsin基因表达的变化规律
• 1 adipsin基因的克隆
• 2 不同生长阶段adipsin基因表达的变化规律
• 第四章 脂肪细胞分化调控转录因子基因表达与体脂沉积的关系
• 第一节 PPARγ基因表达水平与体脂沉积的关系
• 第二节 C／EBPα基因表达水平与体脂沉积的关系
• 第三节 ADD1基因表达水平与体脂沉积的关系
• 小结
• 创新点
• 研究展望
• 参考文献：
• 附录 攻博期间发表的论文
• 致谢