肉鸡热应激损伤与热休克蛋白70表达的研究

论文摘要

热休克蛋白（heat shock proteins，HSPs）是在机体受到应激原的刺激后产生的几族蛋白质，具有高度保守性，对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。HSPs具有多种生物学功能，如分子伴侣作用、协同免疫作用、抗细胞凋亡作用和抗应激作用等，其中分子伴侣作用是其最基本的生物学功能。HSPs作为一类重要的非特异性细胞保护蛋白，在应激耐受和应激保护中发挥重要作用。通常人们根据HSPs的分子量大小，将其分成6个家族：小分子量HSPs家族、HSP40家族、HSP60家族、HSP70家族、HSP90家族和大分子HSPs家族。其中HSP70家族是最保守和最重要的一族，在大多数生物中含量最多，在细胞应激后生成最显著，家族成员也最多。本文主要从肉鸡的热应激损伤、HSP70 mRNA水平的变化、HSP70蛋白水平的改变等方面探讨肉鸡热应激损伤与热休克蛋白70表达的相关性。 将120只30日龄的肉鸡随机分为对照组、热应激6h组、热应激12h组、热应激18h组、热应激24h组和热应激48h组共6组。经过30天的适应性饲养后，除对照组不进行热应激处理，温度控制在25±1℃外，热应激组的环境温度在20min内从室温突然升至40±1℃。按照试验设定的时间，分别剖杀对照组鸡和热应激处理鸡，取全血制备血清，同时取肉鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织，一部分固定在10％中性福尔马林溶液中，一部分速冻于液氮并置-70℃冰柜中保存。 通过测定血清中肌酸激酶（CK）和谷丙转氨酶（GPT）活性，观察热应激对肉鸡的组织病理损伤（主要是心脏和肝脏）程度。试验结果显示，热应激过程中CK和GPT的含量呈现波动性变化，热应激12h时CK和GPT呈现较高水平，提示此阶段心肌和肝脏发生严重损伤；热应激24h时CK和GPT呈现较低水平，提示此时热应激对心肌和肝细胞损伤有所缓和。进一步通过受试鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织的组织病理结果发现，心脏主要表现为心肌纤维断裂，肝脏和肾脏主要表现为细胞坏死，肺脏主要表现为出血和坏死，脾脏、胸腺和法氏囊主要表现为淋巴细胞坏死。 通过RNA探针的原位杂交试验研究诱导型热休克蛋白70（HSP70）mRNA在肉鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织中的分布情况。结果显示，热应激时HSP70 mRNA主要分布在肝脏和肺脏中，尤其在血管壁或血管周围最为明显；心

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第一篇 文献综述
• 第一章 热应激概述
• 1 热应激的概念
• 2 热应激对机体的影响
• 第二章 HSP70概述
• 1 HSP70的概念
• 2 HSP70的生物学特性
• 3 HSP70的生物学功能
• 4 HSP70与细胞凋亡
• 5 HSP70与机体免疫
• 6 HSP70与心血管功能
• 7 HSP70的研究展望
• 参考文献
• 第二篇 试验研究
• 第一章 热应激状态下肉鸡的组织病理损伤
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 热应激状态下HSP70 mRNA在肉鸡组织中的定位研究
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 热应激状态下肉鸡组织中HSC70 mRNA和HSP70 mRNA定量分析
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 肉鸡HSP70的基因克隆表达及其抗体的制备
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 第五章 热应激状态下HSP70在肉鸡组织中的定位研究
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 第六章 热应激肉鸡组织中HSP70定量方法的建立
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 讨论
• 4 小结
• 全文讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 附录1-主要试剂配制
• 附录2-发表或接受文章
• 致谢