异种脱细胞真皮基质移植实验研究

论文摘要

目的:研究异种（猪）脱细胞真皮基质（Xeno-ADM）作为一种新型软组织填充材料的可行性。方法:在体外对Xeno-ADM进行细胞毒性评价;建立SD大鼠皮下脱细胞真皮基质（ADM）移植模型,实验分为四组:1、保留完整基底膜的Xeno-ADM移植组,简称基底膜组;2、去除基底膜的Xeno-ADM移植组,简称去基底膜组;3、异体脱细胞真皮机制（Allo-ADM）移植组,简称异体组、4、无移植物组为空白对照组。观察ADM移植后2w-32w组织形态学动态变化;采用ELISA、WESTEN和实时定量PCR方法检测ADM移植后2w-32w大鼠血清中TNFα、IFNγ、IL-6、IgG、抗-ADM抗体表达水平变化。结果:1、Xeno-ADM体外细胞毒性1级。2、ADM移植后2w-16w,炎性反应强弱次序依次为:基底膜组＞去基底膜组＞异体组;移植物外形成的纤维包膜厚度为:基底膜组＞去基底膜组＞异体组;16w后三实验组炎性反应明显减弱;纤维包膜不明显;2w-32w,移植物内血管化程度:基底膜组＜去基底膜组＜异体组。3、IgG、抗-ADM表达水平在ADM移植2w时最高,而TNFα、IFNγ、IL-6表达水平在ADM移植后8w最高,上述所有指标在移植后16w趋向稳定,接近对照组。但三实验组TNFα、IFNγ、IL-6、IgG、抗-ADM表达水平高低依次为:基底膜组＞去基底膜组＞异体组。结论:1、Xeno-ADM无明显毒性。2、Xeno-ADM移植后早期（＜16w）,局部会引发体液免疫和细胞免疫（单核一巨噬细胞和淋巴细胞为主）参与的炎症免疫反应。3、移植早期,去基底膜的Xeno-ADM移植优于带基底膜的Xeno-ADM移植。基底膜成分如Ⅳ型胶原和层粘蛋白是引发宿主免疫反应增强的主要因素。4、Xeno-ADM植入大鼠体内性能稳定、降解不明显,无感染、肉芽肿、硬结形成,组织相容性好,可作为一种新型生物性软组织充填材料。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 详细摘要
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 体外细胞毒性研究
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 第二部分 异种脱细胞真皮基质在体移后组织形态学变化
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 第三部分 异种脱细胞真皮基质在体移植免疫学的实验研究
• 一、材料
• 1.实验材料
• 2.实验动物
• 二、实验方法
• 1.实验分组
• 2.实验操作
• 三、ELISA
• 1.试剂
• 2.器材
• 3.实验步骤 己知抗原检测抗体
• 4.实验步骤 已知抗体检测未知抗原（试剂盒）
• 四、WESTERN检测血清IgG、IFN-γ、TNF-α
• 五、实时定量PCR
• 六、数据处理及统计学分析
• 七、结果
• 讨论
• 参考文献
• 全文小结
• 本课题的创新点和意义
• 致谢
• 文献综述
• 附录:学习期间发表的论文