膜联蛋白家族新成员的结构，功能和进化

论文题目: 膜联蛋白家族新成员的结构，功能和进化

论文类型: 博士论文

论文专业: 遗传学

作者: 王凯慧

导师: 孙树汉

关键词: 膜联蛋白,猪囊尾蚴,结构与功能关系,同源模建,缺失体,抗原性,凝血时间,进化

文献来源: 第二军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: Annexin B2（Anx B2）和Annexin B2（Anx B3）是新克隆出的两个非脊椎动物的膜联蛋白家族新成员。它的结构、功能和进化的分析研究,对与全面了解膜联蛋白家族的生物学功能以及进化具有重要意义。膜联蛋白家族是一类钙磷脂结合蛋白超家族,存在于大多数真核生物细胞内,有着十分广泛且重要的生理功能,如参与细胞骨架运动、调节细胞生长、形成膜离子通道、参与细胞信号转导等。这类蛋白结构上具有明显特征:C端保守区大多由α螺旋组成,其中含有主要的Ca2+磷脂结合活性位点;N端为可变区,不同家族成员N端序列组成及长度各不相同。 Anx B2和Anx B3是我们用简并引物-PCR方法从猪囊尾蚴中克隆得到的新基因。将其核酸和氨基酸序列进行同源比较和分析,确认它们是两个新的Annexin家族成员。作为扁形动物门发现的Annexin家族成员,研究Anx B2和Anx B3不仅可以了解其对猪囊尾蚴寄生、移行、生长、发育等生命活动的重要意义,为预防和治疗该类疾病提供新的途径,而且可以为整个Annexin家族的研究提供有意义的遗传及分子进化学资料。因此我们构建了Anx B2和Anx B3的融合表达载体,在大肠杆菌中实现了高表达,利用亲和层析及离子交换层析技术纯化蛋白;采用计算机同源模建、缺失体的构建研究Anx B2和Anx B3结构与功能的关系;并对它们的抗原性和抗凝血功能等方法研究了Anx B2和Anx B3的主要生物学活性。同时与Anx B1（1997年由本教研室发现）的部分功能进行比较。本研究主要结果如下: 1.用简并引物 -PCR方法从囊尾蚴中克隆出Anx B2和Anx B3两个新基因,Anx B2和Anx B3的cDNA分别含有1065和910 bp开放阅读框,编码355、310个氨基酸,计算分子量为38682.05和35874.19 Dalton。 2.通过Blast同源性检索,表明Anx B2和Anx B3与Annexin家族成员高度同源;它具有4个典型的Annexin重复保守结构域:二级结构预测Anx B2和Anx B3均以α螺旋为主,无明显跨膜区,无信号肽,提示其为胞浆蛋白,这些与Annexin特征相符。将Anx B2和Anx B3编码序列克隆至原核表达载体pGEX-5T,亲和层析纯化后得到其融合蛋白。经N端测序证明与预测序列完全一致。根据以上的结构特点表明Anx B2和Anx B3属于Annexin家族,又由于它们N端与现有Annexin家族成

论文目录:

英文缩写

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分膜联蛋白家族成员—Anx B2，Anx B3的发现

材料与方法

结果

讨论

第二部分 Anx B2，Anx B3结构与功能关系的研究

材料与方法

结果

讨论

第三部分囊尾蚴膜联蛋白家族的进化

材料与方法

结果

讨论

参考文献

总结

综述

发表论文

致谢

发布时间: 2005-07-19

参考文献

[1].膜联蛋白B1的功能研究及其在蛋白分离和纯化中的应用[D]. 高远舰.第二军医大学2005
[2].膜联蛋白家族新成员的克隆及其结构与功能的研究[D]. 张毅.第二军医大学2004
[3].膜联蛋白Al在小鼠睾丸中的表达、定位及其与受精的关系[D]. 魏玉珍.河北医科大学2006
[4].莲膜联蛋白的鉴定及其在种子耐热性和活力中的功能研究[D]. 楚璞.中山大学2011
[5].沉默膜联蛋白A1对兔骨髓间充质干细胞和成骨细胞生物特性的影响[D]. 梁博伟.广西医科大学2012
[6].大鼠TRPV4与膜联蛋白A2及微管蛋白β5相互作用研究[D]. 怀娟.山东大学2012
[7].一个新的膜联蛋白亚家族—AnxB1的鉴定及其抗凝血功能的研究[D]. 颜宏利.第二军医大学2002

膜联蛋白家族新成员的结构，功能和进化

猜你喜欢