论文摘要
目的:通过急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠模型观察奥美沙坦酯对血压（blood pressure,BP）、离体胸主动脉内皮舒缩功能、外周血血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）和一氧化氮（nitrous oxide,NO）含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性、心肌梗死面积、心肌胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）mRNA和cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）mRNA表达的影响效应,旨在研究AMI后大鼠血管内皮功能的变化与ERK/CREB信号通路的改变以及奥美沙坦酯的干预。方法:（1）大鼠心肌梗死模型建立和实验分组:结扎Sprague-Dawley（SD）大鼠冠状动脉左前降支建立AMI模型,将术后24小时（hour,h）存活的24只大鼠随机分为三组:急性心肌梗死组（AMI组）（n=8）;奥美沙坦酯低剂量（olmesartan medoxomil low dose,OML）组（n=8）,给药剂量为1mg/kg/d;奥美沙坦酯高剂量（olmesartan medoxomil high dose,OMH）组（n=8）,给药剂量为3mg/kg/d。共给药2周。另设一假手术（sham operation,Sham）组（n=7）。将奥美沙坦酯研碎溶于助溶剂配成药液,术后24h开始一天一次灌胃,Sham组及AMI组均以同样方法喂予等体积助溶剂。（2）观察指标:①尾动脉血压:分别于术前、术后24h（灌胃前）、1周（week,w）、2w测量;②血清NO含量及NOS活性:术后2w经眼眶后静脉丛取外周血,采用硝酸还原酶法测定;③血浆AngⅡ含量:术后2w取外周血方法同前,采用放射免疫法测定;④离体胸主动脉条片内皮舒缩功能:术后2W处死动物,取胸主动脉制成条片行离体器官灌流实验,测定其对去氧肾上腺素（phenylephrine,PE）的收缩反应、对乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）的内皮依赖性舒张（endothelium-dependent diastole,EDD）反应和对硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）的非内皮依赖性舒张（non-endothelium-dependent diastole,NEDD）反应;⑤心脏组织病理改变及心肌梗死面积测算:处死动物后做左室横切面石蜡切片,通过HE染色测算心脏瘢痕长度占左室总周长的百分比,以此百分比代表心肌梗死面积;⑥心肌ERK和CREB的mRNA表达:采用逆转录酶聚合酶链反应（ reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR）法半定量检测。结果:（1）尾动脉收缩压:在术前、术后24h、1w及2w各组大鼠尾动脉收缩压之间无明显差异。（2）血清NO含量及NOS活性:与Sham组相比,AMI组血清NO含量和NOS活性均明显降低,差异有显著性;与AMI组相比,OML组和OMH组NO含量和NOS活性均明显升高,达到Sham组水平,OMH组NO含量和NOS活性较OML组高,但差异无显著性。（3）血浆AngⅡ含量:与Sham组比较,AMI组、OML组和OMH组血浆AngⅡ含量均增高,差异有统计学意义;与AMI组比较,OML组无显著性差异;OMH组血浆AngⅡ水平较AMI组与OMH组明显增高,均为p<0.05。（4）离体胸主动脉条片内皮舒缩功能:与Sham组比较,AMI组EDD功能显著受损,P<0.05;经奥美沙坦酯干预后,胸主动脉EDD功能明显改善,两奥美沙坦酯治疗组与AMI组比较,差异均有统计学意义;OMH组似能更好地改善EDD功能,但与OML组差异无统计学意义。而各组对PE的收缩反应和对SNP的NEDD反应比较,均为P﹥0.05;（5）心脏HE染色及心肌梗死面积:Sham组心肌HE染色正常;AMI组及奥美沙坦酯干预组梗死区均可见心肌纤维溶解断裂,大量炎性细胞、成纤维细胞浸润,瘢痕组织形成,非梗死区心肌纤维排列整齐;奥美沙坦酯呈剂量依赖性缩小心肌梗死面积;（6）心肌ERKmRNA及CREBmRNA表达:在Sham组ERKmRNA和CREBmRNA表达低;在AMI组其表达明显增加;奥美沙坦酯呈剂量依赖性降低该表达。结论:（1）AMI后两周SD大鼠血管内皮功能即显著性减退;（2）AMI后血中AngⅡ水平增加,伴随心肌ERKmRNA和CREBmRNA表达水平增高,提示AMI后ED的发生可能与AngⅡ经血管紧张素Ⅱ1型受（angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R）途径上调ERK/CREB通路基因表达有关;（3）奥美沙坦酯能够显著改善AMI后紊乱的内皮功能,缩小心肌梗死面积;（4）奥美沙坦酯呈剂量依赖性降低AMI大鼠心肌ERK及CREB的mRNA表达,提示奥美沙坦酯通过阻断AT1R而下调ERK/CREB通路基因表达,其效应与内皮功能之间关系如何,尚需进一步深入研究;（5）奥美沙坦酯保护AMI大鼠血管内皮功能的作用独立于降低血压效应之外。