川芎多糖的分离纯化及其结构分析

论文摘要

川芎,一种中药植物,在我国有着悠久的药用历史,因具有独特的药用价值常被用于治疗头痛、活血化瘀等疾病。其植物分布于我国各地,主要栽培于四川、云南、湖北、贵州、广西等几个省份。本实验研究川芎干燥根茎中的多糖组分,以川芎的根茎为实验材料,分离纯化川芎多糖并对其多糖结构进行一系列分析,为今后研究其生物学活性奠定理论基础。主要研究内容如下:从干燥的川芎根茎中制备出粗多糖,经冻融分级、酶法和Sevag法联合脱蛋白、Sepharose CL-6B柱层析制备出一个纯化级分,即水溶性多糖LPC。苯酚-硫酸法测LPC糖含量为98.92%。经Sepharose CL-6B柱层析和HPLC分析,LPC分子量约为49kDa。G.C分析表明LPC单糖组成为:葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖,且比例为15.56:5.17:3.84:1.00。经部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及IR、GC、GC-MS等方法对LPC进行结构分析。甲基化的结果表明:Glc以1→4连接为主,还存在1→6键型;Man存在1→3,6和1→3两种键型;Gal主要以1→进行连接,而Ara则以1→3进行连接。部分酸水解的结果表明:LPC主链由Glc和Man组成,Glc构成靠近主链核心区的结构, Glc、Ara和Man位于支链上,末端残基为Gal。高碘酸氧化与Smith降解的结果表明:1→4为主要键型,同时也存在1→3,6、1→6、1→3、1→键型,结果与甲基化结果基本一致。综合以上结果对LPC结构进行初步解析:LPC由Glc、Gal、Man、Ara四种单糖组成;Glc和Man构成LPC的主链,Glc有两种键型,分别为Glc1→4和Glc1→6,且在主链和支链上均有分布;Ara1→3和Man1→3位于LPC的支链;LPC的分支点为Man 1→3,6,末端残基为Gal。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 一、多糖研究进展
• 1.1 多糖的概述
• 1.2 多糖的提取、分离与纯化
• 1.3 多糖的结构研究
• 1.4 多糖的生物活性
• 二、本实验的研究目的和意义
• 第二章 川芎多糖的提取与纯化
• 一、材料、试剂及仪器
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 二、实验方法
• 2.1 川芎多糖的提取
• 2.2 川芎多糖的分离纯化
• 2.3 川芎多糖的理化性质的研究
• 三、结果与讨论
• 3.1 总糖的含量
• 3.2 蛋白质的含量
• 3.3 粗多糖的分子量分布
• 3.4 LPC 的纯度鉴定及其分子量
• 3.5 单糖组成分析
• 3.6 小结
• 第三章 川芎多糖的结构
• 一、材料、试剂及仪器
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 二、实验方法
• 2.1 红外光谱分析
• 2.2 部分酸水解
• 2.3 高碘酸氧化和Smith 降解
• 2.4 甲基化分析
• 三、结果与讨论
• 3.1 红外光谱分析
• 3.2 部分酸水解
• 3.3 高碘酸氧化和Smith 降解
• 3.4 甲基化分析
• 3.5 小结
• 参考文献
• 致谢
• 在学期间公开发表论文及著作情况