副猪嗜血杆菌流行病学与人工感染猪病理学研究

论文题目: 副猪嗜血杆菌流行病学与人工感染猪病理学研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 预防兽医学

作者: 尹秀凤

导师: 姜平

关键词: 副猪嗜血杆菌,分离,流行病学,病理学

文献来源: 南京农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)是猪Glasser’s病的病原菌,临床上以纤维蛋白性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征。HPs属于巴斯德菌科(Pastteurellaceae Pohl,1981) 嗜血杆菌属(Haemophilus winslow et al.,1917)。HPs是一种不运动、NAD依赖型、革兰氏阴性细小杆菌。近年来,随着我国规模化养猪场的发展,副猪嗜血杆菌感染有明显增加趋势,已成为猪场保育仔猪发病率和死亡牟增加的重要原因之一,并给养猪业造成重大经济损失。本文从HPs的诊断、流行病学及病理学3个方面进行了系统研究,结果如下: 1、副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立:副猪嗜血杆培养条件比较苛刻,常规生化方法比较烦琐。本研究根据Oliveira等发表的副猪嗜血杆菌16S rRNA基因特异性PCR引物序列,合成一对PCR引物,通过PCR反应条件的优化、特异性和敏感性的测定、及细菌DNA提取方法的选择,建立了一种快速、简洁、准确的PCR方法用于检测副猪嗜血杆菌。PCR扩增片段为编码16S rRNA的DNA片段,大小为822bp,最小检测量为1080个HPs细菌。与大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌无特异性反应。用该法检测人工感染发病仔猪不同内脏组织悬液及自然感染仔猪肺组织,结果为:用来自试验感染猪的肺脏、心脏和肾脏抽提的DNA做模板,扩增的结果为阳性;而用试验感染猪的肝脏、脾脏、脑和来自自然感染猪的临床样品抽提的DNA做模板,扩增的结果为阴性。证明以肺脏组织为病料,通过细菌分离培养,再用PCR法鉴定分离个体、可有效地用于HPs的诊断。 2、副猪嗜血杆菌流行病学调查:对2003年11月份～2005年4月份送检的159个患病猪场仔猪肺脏进行了副猪嗜血杆菌分离培养和PCR鉴定,结果为该菌阳性猪场次76个,占48%。流行病学结果为,该病发生与季节、猪的日龄和地区有关。该研究结果表明,副猪嗜血杆菌已在我国不同地区广泛流行。 3、副猪嗜血杆菌人工感染猪病理学观察:用三个副猪嗜血杆菌分离株通过滴鼻途径分别感染断奶仔猪,结果均可复制出临床疾病。发病仔猪临床表现为体温中度升

论文目录:

摘要

Abstract

第一部分 文献综述

1 病原学

1.1 生理生化特性

1.2 血清型

1.3 致病因子

2 病理学

3 流行病学

3.1 血清学分型

3.2 基因分型

4 致病机理

5 感染动物模型

6 临床病理学

7 协同感染

8 诊断

9 防制

10 小结

参考文献

第二部分 实验部分

第一章 副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与应用

1 材料与方法

1.1 主要试剂

1.2 细菌

1.3 病料

1.4 PCR引物

1.5 副猪嗜血杆菌病的人工复制

1.6 副猪嗜血杆菌的分离培养

1.7 细菌DNA提取

1.8 PCR反应

1.9 PCR特异性试验

1.10 PCR灵敏性试验

1.11 PCR产物克隆与DNA序列分析

2 结果

2.1 PCR条件的确立

2.2 细菌DNA提取方法的选择结果

2.3 特异性试验

2.4 灵敏性试验

2.5 临床检测样品的选择

3 讨论

参考文献

第二章 副猪嗜血杆菌的流行病学调查

1 材料与方法

1.1 样品来源

1.2 主要试剂

1.3 PCR引物

1.4 临床流行病学

1.5 细菌分离

1.6 细菌DNA提取

1.7 PCR反应

1.8 统计处理

2 结果

2.1 细菌分离与鉴定

2.2 不同时间副猪嗜血杆菌检测结果

2.3 不同地区副猪嗜血杆菌检测结果

2.4 不同曰龄副猪嗜血杆菌感染情况

2.5 临床症状

2.6 病理变化

3 讨论

参考文献

第三章 副猪嗜血杆菌人工感染猪的病理学观察

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 副猪嗜血杆菌菌株

1.3 主要试剂

1.4 动物感染

1.5 细菌分离与鉴定

1.6 组织切片制作与观察

2 结果

2.1 临床表现

2.2 细菌分离与鉴定

2.3 肉眼病理学变化

2.4 病理组织学观察

3 讨论

参考文献

全文总结

致谢

攻读学位期间发表的论文

发布时间: 2005-07-19

参考文献

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• [3].复方中药“禽康散”对NDV人工感染鸡治疗效果研究[D]. 杨军.四川农业大学2008
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