论文摘要
五灵脂与人参,是中药十九畏中临床应用较多的一对配伍,本论文对五灵脂与人参配伍进行了实验研究,可为临床合理配伍提供科学有效的重要依据。本论文包括化学实验研究和药理实验研究两大部分。在化学方面主要进行了以下研究:1.运用硅胶柱层析法分别从五灵脂的乙酸乙酯提取物中分离得到2个化合物,分别为:β-谷甾醇和原儿茶酸;从人参中分离提取得到3个化合物,分别为:人参皂苷Rs、Rc、Rb1。2.本论文对五灵脂脂肪酸及其他脂溶性成分进行了GC-MS分析,鉴定出42种化合物,其中脂肪酸15种,占脂溶性成分总含量的49.162%,非脂肪酸类成分27种,占脂溶性成分总含量的44.184%。本论文还采用水蒸气蒸馏法提取了五灵脂的挥发油。3.本论文通过中医药数据库中五灵脂与人参配伍应用的方剂考证,选取了4个应用较广泛的配伍比例,分别为:五灵脂与人参配伍5:1、3:1、1:1、1:3。并分别用紫外分光光度法、高效液相法对不同比例配伍后样品中的总黄酮、原儿茶酸、总皂苷和9种单体皂苷的含量变化进行了考察,结果表明:①对人参皂苷的含量测定表明:二者并用后使人参皂苷类活性成分含量普遍降低,总皂苷及不同配伍比例的人参皂苷类活性成分降低程度有区别;但配伍比例变化与含量变化并不成线性关系,且经配伍后的样品中人参皂苷Rb3含量明显升高。②对总黄酮的含量测定表明:配伍后溶液中的总黄酮含量变化显著,但并不成线性相关,且五灵脂与人参配伍为3:1时,溶液中总黄酮含量达到一个接近于单一五灵脂溶液中的总黄酮含量值。③对原儿茶酸的含量测定表明:配伍后溶液中的原儿茶酸含量变化显著,且五灵脂与人参配伍为5:1,3:1,1:1时,溶液中的原儿茶酸含量都明显高于单味五灵脂中的原儿茶酸含量。在药理实验方面主要进行了以下研究:1.抗氧化方面,本论文采用DPPH法,对五灵脂不同溶剂提取物及其挥发油、五灵脂与人参不同比例配伍后的醇提物进行体外抗氧化活性研究,结果表明:各组分均对·DPPH自由基有清除能力。五灵脂的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对·DPPH有较强的清除能力;五灵脂的清除·DPPH自由基能力比人参更好,合用后,随着五灵脂量的减少,添加人参量的增加,其清除·DPPH的能力逐渐减弱。2.抑菌方面,本文选择了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对五灵脂不同溶剂提取物及其挥发油、五灵脂与人参不同比例配伍后的醇提物的体外抑菌活性进行研究,结果表明:各组分对大肠杆菌ATCC8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538均表现出不同的抑制其生长的活性。五灵脂不同溶剂提取物中,氯仿提取物和乙酸乙酯提取物对两种菌的抑菌效果都尤为显著,其中在氯仿提取物浓度为25 mg/ml时,对两种菌的抑制率都最高,达到60.06%和57.81%,与空白对照组比较有极显著差异(P<0.01);五灵脂的挥发油对大肠杆菌ATCC8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538的生长均具有抑制作用,但抑菌效果并不明显;五灵脂与人参的醇提物对两种菌的生长也都具有抑制作用,但五灵脂与人参二者醇提物比较,五灵脂醇提物的抑菌作用明显优于人参醇提物抑菌作用,随着配伍比例中五灵脂量的减少,配伍后的醇提物对两种菌生长的抑制作用也逐渐降低,以5:1配伍的醇提物浓度为25 mg/ml时,抑制率最高,达到73.55%和60,58%,与空白对照组比较有极显著差异(P<0.01),且以5:1比例配伍的醇提物,其抑菌效果最为显著甚至强于单一五灵脂的抑菌效果。