论文摘要
本文研究了微小RNA-122（miR-122）在原发性肝癌中的表达及其临床意义,并初步探讨了miR-122的靶基因和相应的功能。课题分为两个部分。第一部分:实时荧光定量RT-PCR方法的建立及miR-122与肝癌的关系研究;第二部分miR-122靶分子的确定及功能研究。首先建立一个特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭的实时定量荧光RT-PCR方法,研究了miR-122在肝癌组织中的表达情况,对肝癌组织和癌旁组织miR-122的表达进行检测。发现与癌旁组织相比,癌肿组织的miR-122表达是下降的。miR-122表达的改变与肿瘤的分化程度有关,也与肿瘤的纤维化程度有关,提示可能作为新的诊断和预后指标。经生物信息分析,层粘蛋白Y 1亚单位可能是miR-122的靶基因。有两个潜在的结合位点,结合可能性大,自由能低。构建miR-122表达载体和合成miR-122的反义序列（AMO-122）,与分离的肝星状细胞作用,从功能增强和抑制两个方面研究其功能。半定量Western Blot分析,miR-122的表达与LAMC1呈负相关,能够通过正、负两个方面调控靶基因LAMC1的表达。本课题初步探讨了miR-122的表达及与靶基因LAMC1的相互作用,miRNA对HSC的激活不仅与肝纤维化、肝硬化有关,而且与肿瘤发生有关,本研究只是提出了一个设想,从一个全新的角度认识肝硬化和肝癌,为肝癌的发病机制和治疗方法提供新的思路和实验依据。
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