论文摘要
内生真菌是指那些在其生活史中的某一段时期生活在植物组织内,对植物组织没有引起明显病害症状的真菌。近年来的研究表明,内生真菌可以产生与宿主相同或相似的代谢产物,对相应的内生真菌及其代谢产物的研究已经成为寻找药物来源的一种新途经。本文以名贵药用植物——石斛（Dendrobium SW.）为实验材料,从8种石斛的根、茎、叶中分离得到92株内生真菌,经过筛选,在流苏石斛茎、长苏石斛叶中得到两株炭角菌,分别编号为LSJ1和CSY1,并诱导两株菌产生有性繁殖结构;采用形态学和分子生物学结合的方法对其进行鉴定,鉴定结果显示两株菌均为Xylaria venosula;并测定了这两株菌的发酵终点、胞内及胞外多糖含量、胞内及胞外水溶性蛋白含量、抑菌活性等。β—谷甾醇是流苏石斛的重要活性成分,对12株流苏石斛内生真菌进行PD液体发酵培养,采用高效液相色谱（HPLC）法从其中三株菌（LSJ1、LSJ5、LSY4）的菌丝体中检测出β—谷甾醇,含量依次为:7.94ug/g,0.274ug/g,11.51ug/g;采用形态学和分子生物学结合的方法对这三株菌进行鉴定,鉴定结果显示LSJ1为:Xylaria venosula,LSJ5属于Valsaceae,LSY4为:Colletotrichum gloeosporioides。对多年生（金钗）石斛总DNA的提取方法进行了优化,改进了提取液配方,提高了CTAB的浓度（2.5%）和NaCl浓度(1.4mol·L-1),并在酚氯仿抽提后的水相中加入0.5倍体积的高浓度NaCl（5mol/L）除多糖,然后再加2体积的无水乙醇沉淀DNA,收到较好效果。