赵明会金立弟韩宇（吉林省吉林市食品药品检验所132001）
【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）24-0194-02
【摘要】目的采用高效液相色谱法测定桂灵丸中盐酸麻黄碱的含量。方法采用HP1C法,Apo11o-C18(250mm×4.6mm,5µm)色谱柱,流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈(94∶6),流速为1.0m1·min-1,紫外检测波长为207nm,柱温为室温。结果盐酸麻黄碱在2.00～49.95µg·m1-1线性关系良好,r=0.9997,平均回收率99.70%,RSD=0.53%。结论本方法准确、简便、快速,可作为桂灵丸中盐酸麻黄碱的含量测定。
【关键词】高效液相色谱法桂灵丸盐酸麻黄碱
【Abstract】ObjectiveToestab1ishamethodforthedeterminationofephedrinehydr℃h1orideinGui1ingcapsu1es.MethodsHP1Cmethodwasusedtodeterminethecontent.Theco1umnwasApo11o-C18(250mm×4.6mm,5µm),andthemobi1ephase:0.01mo1·1-1potassiundihydrogenphosphate-acetonitrine(pHadjustedto2.5withphosphoricacid)(94∶6).Thef1owratewas1.0m1·min-1andthedetectivewave1engthwas207nm.Resu1tsTheca1ibrationcurvewas1inearwithin2.00～49.95µgforephedrinehydr℃h1oride,theaveragerecoverywas99.70%withRSD=0.53%.Conc1usionThemethodisaccuratewithg00dreproducibi1ityandcanbeusedforthecontentdeterminationofephedrinehydr℃h1orideinGui1ingcapsu1es.
【Keywords】Gui1ingcapsu1eephedrinehydr℃h1orideHP1Cassaying
桂灵丸由麻黄、罂粟壳、苦杏仁（炒）、五味子、核桃仁、豆蔻6味中药制成的丸剂,具有收敛肺气、止咳定喘之功效,用于肾虚作喘,肺虚久咳[1]。该制剂收载于卫生部药品标准中药成方制剂第二册WS3-B-0368-90，无含量测定方法。为了有效控制药品质量，提高该制剂的质量标准，本文采用高效液相法测定盐酸麻黄碱的含量，结果表明，该方法、准确、简便、可行，可供该制剂质量控制参考。
1仪器与试药
1C－2010A高效液相色谱仪，C1ASS－VP色谱工作站；盐酸麻黄碱对照品（批号：171241-201007）盐酸麻黄碱，由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用；桂灵丸为市售样品（吉林国药制药有限公司，批号：110101，110301，110601）。乙腈为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件
Apo11oC18柱（250mm×4.6mm，5µm）色谱柱；0.1%磷酸溶液-乙腈(90∶10),流速为1.0m1·min-1；检测波长207nm；柱温35℃。
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品适量，加流动相制成0.0999mg·m1-1的对照品贮备液；再精密量取对照品贮备液适量，加流动相制成9.99µg·m1-1的对照品溶液，即得。
2.2.2供试品溶液的制备取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约2g，精密称定；置1000m1圆底烧瓶中，加20%氢氧化钠溶液120m1，摇匀，加氯化钠7.5g，超声处理（功率320W，频率40kHz）10分钟，蒸馏，用预先盛有0.5mo1/1盐酸溶液5m1的100m1量瓶收集蒸馏液近95m1，放冷，加水至刻度，摇匀，超声处理（功率320W，频率40kHz）10分钟，滤过，取续滤液，即得[2]。
2.2.3阴性样品溶液的制备因实验室只能做小量的样品，所以按处方量将取样量减量，取除麻黄以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成丸，再按供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。
2.3专属性试验
分别精密吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各10µ1注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。由图1可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间（盐酸麻黄碱27.851min）的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。
A.对照品B.供试品C.阴性样品1.盐酸麻黄碱（27.851min）
图1桂灵丸HP1C色谱图
2.4线性关系考察[3]
精密吸取盐酸麻黄碱对照品贮备液（浓度：0.0999mg.m1-1）适量，分别置于50m1量瓶中，加流动相定容，配成浓度分别为2.00，9.99，19.98，29.97，49.95µg·m1-1的溶液5份，摇匀，用0.45µm微孔滤膜过滤。精密吸取续滤液各10µ1，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积（A）为纵坐标，其浓度（C）为横坐标，得盐酸麻黄碱的回归方程为：A=25925.70C-19736.48，r=0.9997（n=5），结果表明，盐酸麻黄碱在2.00～49.95µg·m1-1范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.5稳定性试验
精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液（9.99µg·m1-1），按“2.1”项下色谱条件分别在0、4、8、12、24h测定，结果表明盐酸麻黄碱对照品溶液在24h内稳定，RSD为0.9%。
2.6重复性试验
取供试品（批号110101），共5份，分别按“2.2.2供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液，进行测定，求得盐酸麻黄碱含量的RSD为0.8%，表明重现性较好。
2.7精密度试验
精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液（9.99µg·m1-1）10µ1，按“2.1”项下色谱条件重复进样5次测定，计算盐酸麻黄碱峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.5%，表明精密度较好。
2.8加样回收率试验
精密称取已知含量的样品（批号110101，盐酸麻黄碱含量1.6648mg·g-1，平均丸重6.5030g·丸-1）约1g，共9份，分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液(0.0999mg·m1-1）对照品贮备液10m1.15m1、25m1各3份混匀后，按“2.2.2供试品溶液的制备”方法操作，得回收率试验溶液，依法测定，结果见表1[4]。
表1盐酸麻黄碱加样回收率试验
2.9样品含量的测定
精密称取3个批号的样品（每批号5份），按“2.2.2供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10µ1，注入液相色谱仪，测定三批样品中盐酸麻黄碱峰面积，按外标法计算其含量，结果见表2[5]。
表23批样品含量测定结果
3讨论
3.1通过对3批样品中盐酸麻黄碱的测定，结果表明最高含量为10.80mg·丸-1，最低为9.98mg·丸-1，综合考虑确定限量每丸含盐酸麻黄碱不得低于6.0mg。
3.2流动相的选择试验中采用不同的流动相：0.1%磷酸溶液-乙腈(90∶10)，甲醇-水-磷酸（3:97:0.4），甲醇-水（1:1），结果表明采用流动相0.1%磷酸溶液-乙腈(94∶6)的色谱图基线较平稳，分离效果较好。
3.3该方法简便、准确，重复性好，可供该制剂质量控制参考。
参考文献
[1]卫生部药品标准[S].中药成方制剂（第二册）.1990.198.
[2]中国药典[S].2010年版.一部.1157-1158.
[3]周红，俞春芳.HP1C法测定关节克痹丸中大黄素含量[J].中国药师,2007,5（10）:474-475.
[4]杨传，杨仲文，周本宏.HP1C法测定交泰片中盐酸小檗碱的含量[J].中国药师,2009,12（8）:1083-1085.
[5]代龙.HP1C法同时测定桂枝茯苓浓缩丸中桂皮醛与丹皮酚的含量[J].中国药师,2009,12（8）:1085-1087.