本文主要研究内容
作者李雪茹（2019）在《NDRG1对奶牛乳腺上皮细胞增殖和乳脂分泌的影响及作用机制》一文中研究指出：奶牛乳腺炎是由环境变化引发奶牛机体状态发生改变、乳腺机械损伤以及环境病原微生物接触感染等多种因素引起的奶牛常见的临床疾病之一。目前,最常见的原因是金黄色葡萄球菌和大肠杆菌这两种病原微生物的入侵。乳腺组织被感染后,炎症的侵袭会使乳腺上皮细胞的增殖活力以及泌乳能力都会受到影响,给奶牛养殖业带来巨大的经济损失。目前已有大量研究表明分化相关基因1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)与多种肿瘤疾病相关,参与了炎性肿瘤微环境的调控,但NDRG1是否在奶牛乳腺炎的发生过程中发挥功能尚未见报道。对试验前期高通量测序的结果分析后发现,NDRG1在热灭活的大肠杆菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC29213)诱导的炎性奶牛乳腺上皮细胞中相对于正常乳腺上皮细胞呈现高表达。首先通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白免疫印记技术(western blot)对测序结果进行验证,结果显示NDRG1基因和蛋白在热灭活的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的的诱导下表达量均上升。另外,采用RT-q PCR的方法检测了NDRG1在炎性乳腺组织和正常乳腺组织的表达水平,统计分析结果显示NDRG1在炎性乳腺组织中呈现高表达。为了探究NDRG1对奶牛乳腺上皮细胞功能的影响,本研究建立了NDRG1的过表达和干扰的稳转细胞系,探究了NDRG1对炎性细胞因子和趋化因子表达量的影响,然后采用Cell Counting Kit(CCK-8)法检测乳腺上皮细胞的增殖、细胞划痕法检测细胞的迁移能力、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上皮细胞培养基中β-酪蛋白分泌量,并用酶法测定了乳腺上皮细胞甘油三酯的分泌量。此外,近年来文献表明m TOR信号通路与乳腺上皮细胞的增殖和泌乳能力密切相关,本研究采用了western blot的方法检测了AKT、p-AKT、m TOR和P-m TOR的表达水平。结果显示NDRG1抑制乳腺上皮细胞的增殖和迁移能力、β-酪蛋白和甘油三酯分泌、炎性细胞因子和趋化因子的表达以及m TOR信号通路的激活。n3多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)具有明显的抑炎和调节脂代谢的功能,本研究发现n-3PUFA与NDRG1协同作用乳腺上皮细胞影响其炎性细胞因子表达、β-酪蛋白和甘油三酯(TG)分泌。综上所述,本研究结果表明在炎性诱导下,NDRG1在乳腺上皮细胞和乳腺组织的表达水平明显增高,并通过抑制m TOR通路发挥抑制MAC-T细胞增殖、迁移、炎性因子和β-酪蛋白分泌以及甘油三酯合成能力。另外,n-3PUFA协同NDRG1基因抑制MAC-T炎性细胞因子和甘油三酯的分泌,但n-3PUFA对NDRG1基因造成的乳腺上皮细胞β-酪蛋白分泌降低具有抑制作用。
Abstract
nai niu ru xian yan shi you huan jing bian hua yin fa nai niu ji ti zhuang tai fa sheng gai bian 、ru xian ji xie sun shang yi ji huan jing bing yuan wei sheng wu jie chu gan ran deng duo chong yin su yin qi de nai niu chang jian de lin chuang ji bing zhi yi 。mu qian ,zui chang jian de yuan yin shi jin huang se pu tao qiu jun he da chang gan jun zhe liang chong bing yuan wei sheng wu de ru qin 。ru xian zu zhi bei gan ran hou ,yan zheng de qin xi hui shi ru xian shang pi xi bao de zeng shi huo li yi ji bi ru neng li dou hui shou dao ying xiang ,gei nai niu yang shi ye dai lai ju da de jing ji sun shi 。mu qian yi you da liang yan jiu biao ming fen hua xiang guan ji yin 1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)yu duo chong zhong liu ji bing xiang guan ,can yu le yan xing zhong liu wei huan jing de diao kong ,dan NDRG1shi fou zai nai niu ru xian yan de fa sheng guo cheng zhong fa hui gong neng shang wei jian bao dao 。dui shi yan qian ji gao tong liang ce xu de jie guo fen xi hou fa xian ,NDRG1zai re mie huo de da chang gan jun (ATCC25922)he jin huang se pu tao qiu jun (ATCC29213)you dao de yan xing nai niu ru xian shang pi xi bao zhong xiang dui yu zheng chang ru xian shang pi xi bao cheng xian gao biao da 。shou xian tong guo shi shi ying guang ding liang ju ge mei lian shi fan ying (RT-q PCR)he dan bai mian yi yin ji ji shu (western blot)dui ce xu jie guo jin hang yan zheng ,jie guo xian shi NDRG1ji yin he dan bai zai re mie huo de da chang gan jun he jin huang se pu tao qiu jun de de you dao xia biao da liang jun shang sheng 。ling wai ,cai yong RT-q PCRde fang fa jian ce le NDRG1zai yan xing ru xian zu zhi he zheng chang ru xian zu zhi de biao da shui ping ,tong ji fen xi jie guo xian shi NDRG1zai yan xing ru xian zu zhi zhong cheng xian gao biao da 。wei le tan jiu NDRG1dui nai niu ru xian shang pi xi bao gong neng de ying xiang ,ben yan jiu jian li le NDRG1de guo biao da he gan rao de wen zhuai xi bao ji ,tan jiu le NDRG1dui yan xing xi bao yin zi he qu hua yin zi biao da liang de ying xiang ,ran hou cai yong Cell Counting Kit(CCK-8)fa jian ce ru xian shang pi xi bao de zeng shi 、xi bao hua hen fa jian ce xi bao de qian yi neng li 、cai yong mei lian mian yi xi fu shi yan (ELISA)jian ce shang pi xi bao pei yang ji zhong β-lao dan bai fen bi liang ,bing yong mei fa ce ding le ru xian shang pi xi bao gan you san zhi de fen bi liang 。ci wai ,jin nian lai wen suo biao ming m TORxin hao tong lu yu ru xian shang pi xi bao de zeng shi he bi ru neng li mi qie xiang guan ,ben yan jiu cai yong le western blotde fang fa jian ce le AKT、p-AKT、m TORhe P-m TORde biao da shui ping 。jie guo xian shi NDRG1yi zhi ru xian shang pi xi bao de zeng shi he qian yi neng li 、β-lao dan bai he gan you san zhi fen bi 、yan xing xi bao yin zi he qu hua yin zi de biao da yi ji m TORxin hao tong lu de ji huo 。n3duo bu bao he zhi fang suan (n-3PUFA)ju you ming xian de yi yan he diao jie zhi dai xie de gong neng ,ben yan jiu fa xian n-3PUFAyu NDRG1xie tong zuo yong ru xian shang pi xi bao ying xiang ji yan xing xi bao yin zi biao da 、β-lao dan bai he gan you san zhi (TG)fen bi 。zeng shang suo shu ,ben yan jiu jie guo biao ming zai yan xing you dao xia ,NDRG1zai ru xian shang pi xi bao he ru xian zu zhi de biao da shui ping ming xian zeng gao ,bing tong guo yi zhi m TORtong lu fa hui yi zhi MAC-Txi bao zeng shi 、qian yi 、yan xing yin zi he β-lao dan bai fen bi yi ji gan you san zhi ge cheng neng li 。ling wai ,n-3PUFAxie tong NDRG1ji yin yi zhi MAC-Tyan xing xi bao yin zi he gan you san zhi de fen bi ,dan n-3PUFAdui NDRG1ji yin zao cheng de ru xian shang pi xi bao β-lao dan bai fen bi jiang di ju you yi zhi zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自西北农林科技大学的李雪茹，发表于刊物西北农林科技大学2019-07-11论文，是一篇关于分化相关基因论文,酪蛋白论文,奶牛乳腺炎论文,泌乳功能论文,多不饱和脂肪酸论文,西北农林科技大学2019-07-11论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自西北农林科技大学2019-07-11论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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