论文摘要
目的：通过采用HE染色观察腰椎间盘髓核细胞密度及形态学变化；采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling, TUNEL）法检测腰椎间盘组织凋亡细胞；用免疫组织化学链霉素卵白素-过氧化物酶（streptoavidin-peroxidose, S-P）法检测髓核内Caspases-10和Caspases-6的表达情况。研究人类不同年龄段退变腰椎间盘细胞凋亡的规律,并分析各个指标间的相互关系,探讨腰椎间盘退变的机制,为将来通过可能的生物学方法防治腰椎间盘退变提供实验依据和治疗策略。材料和方法：患者组：标本均来源于45例住院并接受手术治疗的腰椎间盘突出症病人。标本经病理学证实均为退变椎间盘组织。患者组分为：青年组（年龄44岁以下）；中年组（年龄45岁至59岁）；老年组（年龄60岁以上）对照组：标本均来源于5例青少年型特发性脊柱侧弯矫形手术患者。所取标本经病理学证实均为正常椎间盘组织。患者组标本均为术中所取出L4/5新鲜椎间盘髓核组织；对照组标本均为术中所取出L2/3新鲜椎间盘髓核组织。采用常规HE染色,观察椎间盘髓核细胞密度及形态学变化。采用TUNEL法检测腰椎间盘髓核中的凋亡阳性细胞率。采用免疫组织化学S-P法检测腰椎间盘髓核中Caspase-10和Caspase-6的表达情况。用PBS代替—抗作为阴性对照。所有数据均应用SPSS16.0统计软件包进行处理,检验水准以P<0.05表示差异有统计学意义。结果：1.细胞密度：对照组髓核内细胞密度为（8.72±0.66）个/HP。中年、青年、老年患者组髓核内细胞密度分别为（7.21±0.78）个/HP；（5.79±0.60）个/HP；（4.49±0.60）个/HP。四个组两两之间差异均有统计学意义（P<0.05）。细胞密度与年龄呈负相关（P<0.01）。2. TUNEL阳性细胞率：对照组髓核内TUNEL阳性细胞率为（17.80±0.62）%。青年、中年、老年患者组髓核内TUNEL阳性细胞率分为（45.71±2.05）%；（53.65±2.93）%；（68.39±4.33）%。四个组两两之间差异均有统计学意义（P<0.05）。髓核内TUNEL阳性细胞率与细胞密度之间呈负相关（P<0.01）；与年龄呈正相关（P<0.01）。3. Caspase-10的表达：对照组髓核内Caspase-10染色阳性细胞率为（32.60±1.64）%。中年、青年、老年患者组髓核内Caspase-10染色阳性细胞率分别为（50.67±2.89）%；（63.12±4.61）%；（75.28±4.26）%。四个组两两之间差异均有统计学意义（P<0.05）。髓核内Caspase-10染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率和年龄之间均呈正相关（P<0.01）。4. Caspase-6的表达：对照组髓核内Caspase-6染色阳性细胞率为（19.32±1.49）%。中年、青年、老年患者组髓核内Caspase-6染色阳性细胞率为（38.58±1.80）%；（53.19±2.67）%；（62.72±4.65）%。四个组两两之间差异均有统计学意义（P<0.05）。髓核内Caspase-6染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率和年龄之间均呈正相关（P<0.01）。结论：Capase-6、Caspase-10蛋白酶参与了腰椎间盘组织细胞调亡的调节,Caspase-6和Caspase-10可能与腰椎间盘退行性变有相关性。
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