论文摘要
本试验以郑单958(Z)、农大108(N)、特爆2号(T)为材料,研究授粉后喷施6-苄基腺嘌呤(6-BA)对玉米胚乳发育及胚乳细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD)的影响。采用生理生化方法,从胚乳细胞数目、内源激素、籽粒营养物质等方面探讨了6-BA处理对玉米胚乳发育的影响;从显微构造、超微构造和分子生物学等方面观察了玉米胚乳PCD过程的特征及6-BA处理对胚乳细胞PCD过程的调控作用,主要研究结果如下:1 6-BA处理对胚乳细胞数目的影响对玉米籽粒胚乳细胞数目的观察发现,6-BA处理提高了3个品种的胚乳细胞数目,且胚乳细胞数目随6-BA浓度的提高而增加。但6-BA处理对3个品种胚乳细胞数目的影响程度不同,与对照相比,郑单958、特爆2号的胚乳细胞增殖达到显著水平,而农大108未达到显著水平。施用6-BA引起胚乳细胞数目的增多,可能是6-BA处理后玉米粒重提高的原因之一。2 6-BA处理对胚乳内源激素含量的影响6-BA处理后,郑单958、特爆2号的Z+ZR、GA含量较对照显著提高,随6-BA浓度的提高而增加。而农大108 Z+ZR、GA含量的提高,未达到显著水平。6-BA处理显著提高了3个品种灌浆前期的iPA含量,同时抑制了玉米灌浆后期胚乳内的ABA的积累,显著提高了郑单958灌浆前期和后期、特爆2号灌浆前中期、农大108灌浆后期的IAA含量。施用6-BA引起籽粒内源激素含量的改变,可能是导致籽粒产量和品质性状改变的原因之一。3 6-BA处理对籽粒营养物质的影响6-BA处理明显提高了3个品种灌浆前中期的蔗糖含量、整个灌浆期的蛋白质含量、籽粒灌浆后期的支链淀粉、总淀粉含量,为形成较高的粒重提供了基础。4玉米胚乳细胞PCD的特点超微结构观察发现,玉米胚乳细胞在发育过程中出现细胞核变形、解体,形成核残体和染色质凝集的现象;在核解体过程中,线粒体出现伴随变化,如线粒体嵴消失呈中央空泡化;琼脂糖凝胶电泳发现,胚乳DNA显示以180-200bp倍增的梯状带。这些现象表明玉米胚乳细胞的死亡是PCD过程。用Evans Blue对胚乳的染色图表明,玉米胚乳细胞死亡始于胚乳上端并高度有序地向下、向外扩展。超微结构与Evans Blue染色结果说明,细胞核消亡后,细胞仍存活,胞质中仍可正常合成和积累淀粉、蛋白质,在胚乳细胞完成了合成与积累营养物质的使命后,即细胞被淀粉充满后,胚乳细胞死亡并形成无生命的营养物质储藏库。5 6-BA处理对胚乳细胞PCD的影响6-BA处理的胚乳出现梯状DNA带的时间与对照一致,但DNA电泳带的亮度比对照明显弱,且随6-BA浓度的增大,减弱程度增强。经Evans Blue染色证明喷施6-BA使得蓝色反应区域面积减小,颜色变浅。超微结构观察亦发现,经6-BA处理的胚乳细胞核降解程度明显轻于对照,以上研究结果均说明,6-BA处理可在一定程度上减缓PCD的过程,从而改善籽粒品质,提高玉米粒重。
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