论文摘要
目的:观察5 -烯丙基-7 -二氟亚甲基白杨素（5-ally-7-gen-difluormethylenechrysin,ADFMChR）抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长作用,探讨其作用是否涉及活化PPARγ,分析ADFMChR诱导SMMC-7721细胞的肿瘤相关基因的基因表达谱改变,为寻找新的具有开发前景的候选抗肿瘤药物提供实验依据和线索。方法:体外培养SMMC-7721细胞。细胞计数法检测ADFMChR、PPARγ阻断剂GW9662及两者合用对SMMC-7721细胞生长的影响;平皿集落形成法检测ADFMChR、GW9662及两者合用对SMMC-7721细胞锚定依赖性生长的作用;软琼脂集落形成法检测ADFMChR、GW9662及两者合用对SMMC-7721细胞集落形成能力的影响;肿瘤相关基因芯片检测ADFMChR诱导SMMC-772 1细胞肿瘤相关基因表达谱的改变。结果:细胞计数法结果显示:1.0、3.0、10.0μM的ADFMChR处理48小时均具有抑制SMMC-7721细胞生长作用,当其浓度由1.0μM增加到10.0μM时,SMMC-7721细胞倍增时间由29.41小时延长到48.89小时,用10.0μMGW9662预孵育SMMC-7721细胞可拮抗ADFMChR的生长抑制作用。平皿集落形成法结果表明:1.0、3.0、10.0μM的ADFMChR对SMMC-7721细胞的集落抑制率分别为10.41%±3.67%,28.01%±2.40%,47.21%±8.66%,而GW9662预孵育SMMC-7721细胞半小时后,3.0μMADFMChR处理48小时的集落抑制率是15.21%±6.04%,明显低于ADFMChR （3. 0μM）组（P < 0. 05）。软琼脂集落形成法结果显示:随ADFMChR浓度增加,集落均数明显减少,而GW9662（10.0μM）预孵育30分钟,3.0μM ADFMChR组的集落数高于3.0μM ADFMChR组（ P < 0. 05）。基因芯片结果:3.0μM ADFMChR处理SMMC-7721细胞4小时后有6个肿瘤相关基因上调,分别为LCN2,MAPK13,MMP14,MMP17,MMP2,TFDP2,23个下调基因分别为ABCB1,ANPEP,RHOD,BHLHB2,CDKN1C,CRHR1,CTSD,DHRS2, FOXO1A,GPR39,ID1,JAK1,PCTK1,PCTK2,ZMYND8,SEMA3C,SMPD1,SPINT2,SRC,STAT2,TRRAP,UCHL1,VHL。结论:1)ADFMChR抑制SMMC-7721细胞生长,呈浓度依赖性,其作用机制与PPARγ活化相关。2)肿瘤相关差异表达基因分析提示:ADFMChR上调MAPK13,下调FOXO1A、GPR39、TRRAP、SEMA3C、SRC、ANPEP、CTSD和ID1等基因,可能与它抑制SMMC-7721生长有关。
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