论文摘要
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性传播疾病，在妊娠期，严重影响母胎的健康和生命安全。胎盘是胚胎发育过程中的先天性免疫器官，在抵御外来病原菌入侵中起重要作用；Toll样受体（Toll like receptor TLRs）是近年来发现的一类先天性免疫系统中的病原体模式识别受体家族，TLRs能够激活先天性免疫，并参与特异性免疫应答的启动，在抵御病原体感染中起重要作用。目前TLRs在胎盘与胎膜的先天性免疫过程中的作用尚不清楚；并且TLRs在妊娠合并梅毒感染胎盘的免疫过程中的作用如何及梅毒感染对TLRs表达的影响尚无人研究。本文的研究目的为：1)．应用半定量RT-PCR技术在mRNA水平、应用Werstern Blot及免疫组化技术在蛋白质水平上分析TLR2、4基因在人胎盘与胎膜上的表达分布以及表达模式2)．应用半定量RT-PCR技术在mRNA水平及免疫组化技术在蛋白质水平上分析TLR2、4基因在不同孕期胎盘中的动态表达研究；3)．应用半定量RT-PCR技术在mRNA水平及免疫组化技术研究妊娠合并梅毒感染胎盘中梅毒螺旋体对TLR2、4的表达影响实验第一部分：TLRs在胎盘与胎膜中的表达及其在胎盘与胎膜发育过程中的动态表达[方法]取妊娠6-12周（人流），12-28（中期水囊引产）；及足月分娩之胎盘与胎膜样本各5例；应用半定量RT-PCR技术对人胎盘与胎膜组织以及不同孕周胎盘组织上TLR2、4基因的mRNA表达的检测；应用Werstern Blot及免疫组化技术对人胎盘与胎膜组织上TLR2、4基因的蛋白表达的检测。[结果]TLR2和TLR4基因mRNA及蛋白质均在妊娠早中晚期人胎盘与胎膜中表达；免疫组化结果显示TLR2和TLR4在人胎膜中的羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞强表达，在人胎盘合体滋养细胞也有表达；并且在不同孕期，TLR2和TLR4基因的表达具有波动性，在妊娠中期，TLR2和TLR4的表达都显著降低。实验第二部分：TLRs在妊娠合并梅毒感染胎盘与胎膜中的表达分布[方法]取妊娠合并梅毒感染及正常足月分娩之胎盘与胎膜样本各5例；应用半定量RT-PCR技术对妊娠合并梅毒感染胎盘与胎膜组织上TLR2、4基因的mRNA表达的检测；应用免疫组化技术对妊娠合并梅毒感染胎盘与胎膜组织上TLR2、4基因的蛋白表达的检测。[结果]TLR2基因在妊娠合并梅毒感染人胎盘与胎膜中表达水平显著高于正常晚期妊娠胎盘与胎膜。TLR4基因在妊娠合并梅毒感染人胎盘与胎膜中表达水平也显著高于正常晚期妊娠胎盘与胎膜。[结论]本文定位了TLR2和TLR4基因在正产晚期人胎盘与胎膜中的表达分布；并且在不同孕期，TLR2和TLR4基因的表达具有波动性。首次发现TLR2和TLR4基因在妊娠合并梅毒感染胎盘与胎膜中高表达。实验结果暗示TLR2和TLR4在妊娠合并梅毒感染胎盘的免疫过程中的可能起重要作用。