低频率超声治疗实体肿瘤的临床研究及低频率超声和敏药碱逆转肿瘤多药耐药的体外研究

论文摘要

低水平超声对恶性肿瘤的生物学效应的研究和应用仍处于研究阶段。一系列的研究显示恶性肿瘤细胞对低强度超声反应不同于正常细胞,因为肿瘤细胞更易被杀死。低强度超声可以抑制细胞的增殖和克隆形成,改善抗癌药物的作用,经过间接机制灭活肿瘤细胞。动物实验发现经低频超声辐射后的微泡剂能够引起肿瘤区域内的血管血栓形成及其周边的肿瘤组织坏死,甚至出血性坏死。这些发现显示低强度超声用于肿瘤的治疗有很大的潜力。由此,我们开展了以下工作:1、观察维生素C注射液+5%碳酸氢钠+706代血浆混合后产生的CO2微气泡的生物动力学特征。2、观察了低水平超声联合CO2微泡剂治疗晚期实体瘤的近期疗效和不良反应。3、用MTT法,免疫组化,PCR和流式细胞仪研究了低频率超声空化效应对多药耐药细胞株K562/ADM和MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用。4、用MTT法,PCR和流式细胞仪研究了敏药碱对多药耐药细胞株K562/ADM和MCF-7/ADM细胞耐药性的逆转作用。结果证实:1、维生素C+碳酸氢钠+706代血浆混合后产生CO2微气泡直径大小与红细胞接近,稳定性较好,对人体安全无害,可以通过肺循环到达肝内静脉,增强了超声空化治疗肿瘤的作用。2、低频率超声空化治疗在临床治疗难治性实体瘤方面的疗效不低于全身化疗,与化疗联合可以提高疗效。3、单纯超声空化治疗在改善病人生活质量方面优于全身化疗,对于那些不能耐受全身化疗的患者,建议行低频超声空化治疗。4、超声空化效应毁损肿瘤微血管,减少肿瘤血液供应是其治疗肿瘤的主要机制。5、超声血管造影在监测肿瘤血管方面具有明显优势,值得临床应用和推广。6、低水平超声体外具有逆转MDR的活性,其逆转机制考虑为通过空化效应增加细胞膜的通透性,增加肿瘤细胞内抗肿瘤药物的浓度,促进肿瘤细胞凋亡;而并不是抑制MDR1基因和蛋白的表达。7、敏药碱可部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性,其逆转机制可能与抑制P-gp功能有关。

论文目录

• 第一部分 文献综述 低频率超声空化作用的发生及其在实体肿瘤治疗方面的研究进展
• 1. 超声波的作用机制
• 2. 超声空化作用治疗肿瘤的机制
• 3. 低频超声空化效应毁损肿瘤血管的基础及临床研究
• 4. 问题与展望
• 第二部分 低频率超声治疗肿瘤的临床研究
• 前言
• 材料与方法
• 1. 病例选择
• 2. 近期疗效判定标准
• 3. 不良反应
• 4. 仪器设备、药品
• 5. 方法及操作程序
• 6. 统计学分析
• 结果
• 2 微气泡在体内、外的生物动力学特征'>1. CO₂微气泡在体内、外的生物动力学特征
• 2. 低功率超声空化效应治疗肿瘤临床疗效观察
• 讨论
• 结论
• 第三部分 低频超声和敏药碱逆转肿瘤MDR的体外研究
• 第一章 低频超声逆转肿瘤MDR的体外研究
• 前言
• 材料与方法
• 1. 材料
• 2 方法
• 2.1 K562/ADM、MCF-7/ADM 细胞耐药倍数检测
• 2.2 确定低频超声的非细胞毒性照射时间
• 2.3 试验分组及超声照射方法
• 2.4 低频超声对细胞存活率的影响
• 2.5 MTT 法检测低频超声对ADM 的增敏效果
• 2.6 用RT-PCR 检测MDR1 基因表达
• 2.7 用免疫组化方法检测P-gp 的表达
• 2.8 用FCM 检测肿瘤细胞凋亡
• 2.9 用FCM 测定肿瘤细胞内阿霉素的浓度
• 2.10 统计学分析
• 结果
• 1. 细胞耐药倍数的检测结果
• 2. 非细胞毒低频超声照射时间的确定
• 3. 低频超声对细胞存活率的影响
• 4. 低频超声对K562/ADM、MCF-7/ADM 细胞耐药的逆转作用
• 5. 低频超声对MDR1 基因表达的影响.
• 6. P-gp 表达的检测结果
• 7. 细胞凋亡检测结果
• 8. 低频超声对细胞内ADM 浓度的影响
• 讨论
• 结论
• 第二章 敏药碱逆转肿瘤MDR的体外研究
• 前言
• 材料与方法
• 1. 材料
• 2 方法
• 2.1 确定敏药碱的的非细胞毒性剂量
• 2.2 试验分组
• 2.3 MTT 法检测敏药碱的增敏效果
• 2.4 用RT-PCR 检测MDR1 基因表达
• 2.5 敏药碱对MCF7/ADM 细胞内Rh123 蓄积量的影响
• 2.6 统计学分析
• 结果
• 1. 敏药碱对K562/ADM、MCF-7/ADM 细胞耐药的逆转作用
• 2. 敏药碱对MDR1 基因表达的影响
• 3. 敏药碱抑制肿瘤细胞膜P-gp 功能的测定
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 中文摘要
• 英文摘要
• 本课题的创新性
• 攻读博士学位期间发表的学术论文
• 致谢