“太岁”的生物学特性及部分基因组测量的研究

论文摘要

“太岁”至今仍为一种尚未有明确定义和分类地位的不明生物体,它的存在、作用和影响在生物学界始终有争议,但科学界目前的研究结果还未能清楚解释“太岁”的生物学进化地位。本研究以“太岁”LNUT 008样品为原材料,从宏观和微观两个角度对太岁的分类地位进行了初步的研究,研究结果如下:“太岁”的表观基本生物学特性为手感似肉,没有叶绿素,“太岁”组织经过干燥后研磨不碎,高温水浴可融化,并且含水量很高。采用扫描电镜和透射电镜对“太岁”进行了微观形态的观察,实验结果表明,“太岁”LNUT 008外表面有球型和块状的规则结晶状物质,内部则含有多囊状的双层膜结构,但未观察到典型的细胞结构和菌丝体。尝试利用植物,动物,真菌,细菌等分子生物学提取试剂盒及其他含有不同裂解液的提取方法提取“太岁”基因组DNA,但均未获得有效DNA条带。本研究对提取基因组的方法进行摸索和优化,创新出一种手工提取基因组DNA的方法,成功获得了“太岁”基因组DNA。以“太岁”基因组DNA作为PCR扩增体系中的模板进行了16S rDNA、18S rDNA及ITS的鉴定,PCR扩增结果显示,均未扩增出目的条带。为继续明确“太岁”的分类地位,直接从“太岁”基因组DNA着手进行“太岁”基因组文库的构建,从而获得“太岁”的部分DNA序列进行比对分析鉴定。利用Sau3AI随机酶切“太岁”基因组DNA,所得片段与单酶切并脱磷酸化的pUC18质粒载体连接,转入E.coliDH5α宿主细胞中,构建部分“太岁”基因组文库。鉴定重组质粒,得到长度不同的插入片段,测序分析所得插入片段,与GenBank数据库中核酸序列进行BLAST比对研究,结果表明所得片段与数据库中片段均无同源性;从上述试验结果可以看出:“太岁”可能为进化史上一类尚未定位的新物种。本研究对于“太岁”本身的生物学特征及分类地位的确定有着突破性的进展。为“太岁”解开“身世之谜”奠定了重要的基础,对“太岁”今后的研究

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 0.1 “太岁”概述
• 0.1.1 “太岁”的概念
• 0.1.2 “太岁”的历史记载
• 0.1.3 “太岁”生物属性的猜测
• 0.1.4 “太岁”的研究进展
• 0.2 本研究的目的及意义
• 第1章 “太岁”的基本生物学特性
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 实验原材料
• 1.1.2 试剂与仪器
• 1.1.3 实验方法
• 1.2 结果与分析
• 1.2.1 “太岁”扫描电镜观察结果
• 1.2.2 “太岁”透射电镜观察结果
• 1.3 本章小结
• 第2章 “太岁”16S rDNA、18S rDNA 及 ITS 的鉴定
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验试剂与仪器
• 2.1.3 实验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 “太岁”基因组DNA 的提取结果
• 2.2.2 PCR 扩增结果
• 2.3 本章小结
• 第3章 “太岁”部分基因组文库构建
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验试剂与仪器
• 3.1.3 实验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 质粒载体pUC18 的提取结果
• 3.2.2 基因组 DNA 片段化及质粒载体 pUC18 的酶切与脱磷酸后结果
• 3.2.3 连接转化后部分基因组文库的构建
• 3.2.4 重组子的筛选及分析鉴定
• 3.3 本章小结
• 第4章 结论与展望
• 4.1 结论
• 4.2 进一步工作方向
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况