论文摘要
目的:研究高脂状态下大鼠成骨细胞BMP2(骨形态发生蛋白2)、ER(雌激素受体)的表达变化情况;研究解氏金丹水丸中药方剂含药血清干预高脂状态时BMP2、ER的表达变化情况。方法:取新生24小时内的SD大鼠颅骨,去除表面血管、骨膜等软组织。利用组织块法原代培养成骨细胞,并进行成骨细胞纯化和鉴定。取第3代成骨细胞,分别在无胆固醇血清和高胆固醇血清培养基中培养,并根据MTT法(测OD值)检测成骨细胞增殖率和细胞形态学观察,选择某一高胆固醇血清浓度,检测BMP2(骨形态发生蛋白2)、ER(雌激素受体)的mRNA水平变化;在以上确定的高胆固醇血清浓度培养状态下,根据是否预先加入解氏金丹水丸中药方剂含药血清,分为实验组与对照组,依照MTT检测细胞增殖的结果和细胞形态学观察得出实验组的最佳血清药物浓度,再次检测BMP2和ER的mRNA表达变化。对上述结果进行分子生物学、免疫学和统计学分析。结果:细胞形态学观察和MTT法检测结果显示,与无胆固醇血清培养成骨细胞相比,高胆固醇血清培养的细胞增殖受到抑制,生长缓慢。采用分子生物学技术检测BMP2、ER的mRNA水平变化,高胆固醇血清中BMP2、ER的mRNA表达明显低于无胆固醇血清(P<0.01);在高胆固醇组中预先加入解氏金丹水丸中药方剂含药血清,再次进行上述分子生物学检测,与空白对照血清干预高胆固醇血清培养细胞相比,加入中药血清组BMP2、ER的mRNA表达水平明显升高(P<0.01),细胞形态学观察可见细胞增殖与生长情况得到改善。结论:高胆固醇血清降低成骨细胞ER、BMP表达,降低成骨活性;解氏金丹水丸中药方剂可以增强高胆固醇血清环境下成骨细胞BMP2、ER的mRNA表达,明显改善成骨细胞生长状态,提高成骨活性。
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