单环刺螠（Urechis unicinctus）多糖的分离纯化和结构研究

论文摘要

单环刺螠（Urechis unicinctus）隶属为螠虫动物门、螠纲、无管螠目、刺螠科、刺螠属,主要分布于我国的黄渤海沿岸海域。本文以单环刺螠为研究对象,采用各种色谱分离技术,从单环刺螠的体壁和内脏中提取分离多糖组分,并采用化学和现代波谱方法对其理化性质、单糖组成和结构进行研究。研究结果如下：1.单环刺螠体壁多糖热水提取的得率为6.1%,经离子交换色谱和凝胶渗透色谱分离纯化得到六个多糖组分：UWA1、UWA2、UWB1、UWB2、UWB3、和UWC1.化学分析表明,六个多糖的总糖含量为51.5～99.7%、蛋白含量为0～10.1%、硫酸基含量为0～7.5%、糖醛酸含量为0～14.2%、氨基己糖含量为0～30.7%。液相色谱法分析表明,UWC1。和UWB1主要由葡萄糖组成,其含量分别为99.4%和98.3%；UWB2以葡萄糖为主,少量甘露糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺；UWA2和UWB3主要含有葡萄糖、葡糖糖胺、半乳糖醛酸和半乳糖胺；UWC1主要由葡萄糖、葡萄糖胺和岩藻糖组成。2.高效凝胶渗透色谱测定UWAl和UWBl的分子量分别为25.8kDa和43.3kDa。甲基化、红外光谱及核磁共振波谱分析表明,UWA1是由→4)-a-Glcp(1→、a-Glcp（1→、→2）-a-Glcp（1→、→4,6）-a-Glcp（1→和→2,4）-a-Glcp（1→糖基组成；UWB1主要含有→4）-a-Glcp（1→、→3,4）-a=Glcp（1→和→4,6）-a-Glcp(1→,少量a-Glcp（1→、→3）-a-Glcp（1→、→3,4,6）-a-Glcp（1→、→2）-a-Glcp（1→和→2,4）-a-Glcp(1→。3.单环刺螠内脏多糖木瓜蛋白酶提取的得率为5.7%,经离子交换色谱和凝胶渗透色谱分离纯化得到五个多糖组分：UOA1、UOB1、UOC1、UOD1和UOE1。化学分析表明,五个多糖的总糖含量为40.2～73.6%、蛋白质含量为0.7～5.8%、硫酸基含量为0～10.5%、糖醛酸含量为0～5.1%、氨基己糖含量为9.4～44.3%。高效液相色谱分析表明,UOA1主要由甘露糖和葡萄糖胺组成,UOB1主要含有葡萄糖胺,UOC1和UOD1主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖和岩藻糖组成,UOE1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺组成。甲基化分析表明,UOA1是由Manp（1→、→3,4）-Fucp（1→、→2）-Manp（1→、→6）-Manp（1→和→3,6）-Manp（1→组成；UOV1以→6）-Manp(1→为主,少量Fucp(1→、Manp（1→、→4）-Fucp（1→、→3,4）-Fucp（1→和→3,6）-Manp（1→;UOC1和UOD1主要由3,4）-Fucp（1→和→6）-Manp(1→组成。本论文的研究成果,对单环刺螠多糖的研究和开发利用、对“海洋糖库”的建设和发展都有重要意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1. 海洋动物多糖的研究
• 1.1 海洋动物多糖的化学特征研究
• 1.2 海洋动物多糖的活性研究
• 2. 多糖的结构研究
• 2.1 多糖的分离纯化
• 2.2 单糖组成分析
• 2.3 分子量的测定
• 2.4 红外光谱分析
• 2.5 甲基化分析
• 2.6 核磁共振波谱分析
• 3. 单环刺螠的研究
• 3.1 单环刺螠概述
• 3.2 形态特征
• 3.3 营养成分
• 3.4 生物活性物质
• 3.5 硫化物清除机制
• 4 本课题的立题背景和研究思路
• 第二章 单环刺螠体壁多糖的分离纯化及理化性质分析
• 1. 实验材料与仪器
• 1.1 实验原料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 2. 实验方法
• 2.1 单环刺螠体壁多糖的提取
• 2.2 脱蛋白方法的确定
• 2.3 单环刺螠体壁多糖的分离纯化
• 2.4 理化性质分析
• 2.5 单糖组成分析
• 3. 实验结果与讨论
• 3.1 单环刺螠体壁粗多糖的化学特征分析
• 3.2 脱蛋白方法的选择
• 3.3 单环刺螠体壁多糖的分离纯化
• 3.4 理化性质分析
• 3.5 单糖组成分析
• 4. 本章小结
• 第三章 单环刺螠体壁多糖UWA1和UWB1的结构研究
• 1. 实验试剂与仪器
• 1.1 实验试剂
• 1.2 实验仪器
• 2. 实验方法
• 2.1 淀粉-碘化钾分析
• 2.2 红外光谱分析
• 2.3 纯度及分子量测定
• 2.4 甲基化分析
• 2.5 核磁共振波谱分析
• 3. 实验结果与讨论
• 3.1 淀粉-碘化钾分析
• 3.2 红外光谱分析
• 3.3 纯度及分子量测定
• 3.4 甲基化分析
• 3.5 核磁共振波谱分析
• 4. 本章小结
• 第四章 单环刺螠内脏多糖的分离纯化及理化性质分析
• 1. 实验材料和仪器
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 2. 实验方法
• 2.1 单环刺螠内脏多糖的提取
• 2.2 单环刺螠内脏多糖的分离纯化
• 2.3 理化性质测定
• 2.4 单糖组成分析
• 2.5 红外光谱分析
• 2.6 甲基化分析
• 3. 实验结果与讨论
• 3.1 单环刺螠内脏多糖的分离纯化
• 3.2 理化性质分析
• 3.3 单糖组成分析
• 3.4 红外光谱分析
• 3.5 甲基化分析
• 4. 本章小结
• 结语
• 参考文献
• 致谢
• 参与发表的学术论文