应激影响肉鸡骨骼肌葡萄糖代谢的机制研究

论文摘要

为探讨应激对肉鸡骨骼肌葡萄糖代谢的影响及内在机制,本研究以外源导入糖皮质激素的方法建立应激反应模型,采用在体和离体试验相结合的方式,较为系统地研究了糖皮质激素、胰岛素和NO三者对肉鸡骨骼肌葡萄糖代谢的独立影响及其组合效应。在第二章中,第一节研究应激对肉鸡机体基础糖代谢的影响,共分长期应激和急性应激两个试验。第二节研究离体CORT处理对肉鸡骨骼肌糖摄取能力的影响,选取21日龄雄性AA肉鸡36只,剥离左右小腿后侧的腓骨长肌,然后体外孵育。将来自同一只鸡的两条肌肉样本组成应激和对照两个配对组,应激组内的肌肉样本进行如下6种处理:CORT、CORT+SNP、CORT+L-NAME、CORT+INS、CORT+INS+SNP和CORT+INS+L-NAME处理,对照组内的肌肉样本也进行6种处理:空白、SNP、L-NAME、INS、INS+SNP和INS+L-NAME处理,每个处理都有6条肌肉样本。孵育结束后,测定肌肉样本的NO水平、NOS的活力和肌糖原含量;同时利用同位素双标法测定在NO供体SNP、NOS抑制剂L-NAME和糖皮质激素CORT存在条件下,基础状态或INS诱导的肉鸡离体骨骼肌的2-DG转运速率。第三节研究活体CORT处理对肉鸡骨骼肌糖摄取能力的影响,试验设计与第二节类似,唯一不同点是将CORT的处理方式由体外孵育液添加改为活体皮下注射。结果发现,SNP引起肌肉基础状态和INS诱导的2-DG转运速率增加,表明NO是调节骨骼肌糖代谢的一个重要因子。CORT引起肌肉基础状态下2-DG转运速率增加,提示其可能是应激状态下机体糖原合成增加的重要原因,但这并不能说明其促进了GLU的有效利用。CORT抑制INS诱导的肌肉对2-DG的转运速率,加入SNP后,骨骼肌的糖摄取能力明显改善,表明应激早期,机体NO浓度的下降,可能与糖皮质激素诱发的IR有一定关系。与前人所做的活体L-NAME处理不同的是,没有观察到离体L-NAME处理对骨骼肌2-DG转运速率的影响,表明血液动力学因素在骨骼肌糖摄取机制中同样起着非常关键的作用。第三章研究内容将GLU与ARG负荷试验结合起来,共分三个试验,分别研究肉鸡在正常生理状态、急性应激状态和高INS状态下的糖代谢状况。试验一、二、三分别选取40、41、42日龄Arbor Acres肉用公鸡24只,分为GLU、GLU+L-ARG、L-ARG和对照四组,所有鸡单笼饲养,首先禁食,6小时后,所有鸡空腹采血,然后试验一肉鸡按0.4ml/kgBW的剂量皮下注射玉米油和生理盐水,试验二肉鸡按0.4ml/kgBW的剂量皮下注射CORT（溶于玉米油,10mg/ml）和生理盐水,试验三肉鸡按0.4ml/kgBW的剂量皮下注射INS（溶于生理盐水,2.5IU/ml）和玉米油。注射完毕后,GLU组肉鸡按5ml/kgBW灌服GLU溶液（0.4g/ml）,GLU+L-ARG组肉鸡按5ml/kgBW灌服GLU和ARG混合溶液（GLU浓度0.4g/ml,ARG浓度0.1g/ml）,L-ARG组肉鸡按5ml/kgBW灌服ARG溶液（0.1g/ml）,对照组按5ml/kgBW灌服蒸馏水。灌服完毕后,每只鸡于30min、60min和120min采血,分离血浆,测定NO、NOS、UA、血糖、TG和INS含量。结果发现,L-ARG能够促进机体NO的产生,在实际生产和临床治疗中可以作为一种NO的供体使用。应激影响动物机体的蛋白质、糖类和脂肪代谢,而L-ARG可以通过抑制应激引起的机体NO水平降低,从而在一定程度上改善机体物质代谢,降低应激的不利影响。应激时糖皮质激素的大量释放诱发IR现象,使用L-ARG处理后,机体的高血糖症有所改善,表明NO水平的下降与IR之间有一定关系。INS与NO之间存在某些特殊联系,NO在维持INS正常的生理功能、促进INS的分泌、提高INS的敏感性,预防IR等方面可能具有积极影响。在血糖浓度正常时,血中L-ARG含量增加,只能对INS的分泌有轻微的刺激作用,但如果在血糖升高的情况下,过量的L-ARG则可使血糖引起的INS分泌加倍增多。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 1 应激的概念
• 2 应激对动物内分泌系统的影响
• 3 应激性高血糖症与 IR
• 4 应激性高血糖症与 NO
• 5 NO 在骨骼肌内的生理作用
• 6 选题的目的和意义
• 第二章 应激对肉鸡骨骼肌糖摄取能力的影响及机制探讨
• 第一节 应激对肉鸡机体糖代谢的影响
• 1 试验目的
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第二节 离体CORT 处理对肉鸡骨骼肌糖摄取能力的影响
• 1 试验目的
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第三节 活体CORT 处理对肉鸡骨骼肌糖摄取能力的影响
• 1 试验目的
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第三章 葡萄糖、精氨酸负荷试验与肉鸡糖代谢
• 1 试验目的
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第四章 总体结论与研究展望
• 参考文献
• 致谢