论文摘要
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)为无囊膜的单股负链DNA病毒,属圆环病毒科(Circoviridae)成员。其基因组为单股环状DNA,病毒粒子无囊膜,呈二十面体对称,是目前已知的最小病毒之一。PCV有1型(PCV1)和2型(PCV2)两种基因型,PCV1首先由Tiseher于PK-15细胞中发现,基因组全长1759bp,无致病变性;PCV2基因组长1767bp或1768bp,被认为是仔猪断奶后多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原。PMWS是一种以进行性消瘦和多系统病理损伤为主要特征的免疫抑制性疾病,主要发生在6-16周龄的断奶仔猪。该病在我国自2000年首次报道以来,已广泛流行于全国各省,威胁着我国的养殖业,并造成了巨大的经济损失。因此加强PCV2的流行病学调查和疫苗研制有重要意义。本研究主要包括以下几方面内容:本调查用ELISA方法对来自安阳地区6个不同猪场的280份血清进行PCV2抗体检测,结果表明不同猪场的感染率参差不齐,介于15.38%-64.53%,总体阳性率为43.21%,进一步证明安阳地区的各类猪群中,PCV2感染较为普遍。从调查结果看出,PCV2抗体阳性率与猪的年龄有一定相关性,即同一猪群,猪的年龄越大,PCV2抗体阳性率越高。结合流行病学、临床症状、病理变化、采用PCR技术对来自安阳市6个县区的131份疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染发病猪的组织病料(脾、肺、淋巴结)进行了PCV2检测,阳性率为63.36%,表明PCV2在安阳地区已经普遍存在和流行。从发病季节来看,秋季(9月-11月)PCV2阳性率最高,为71.43%,同时这段时间也是采集病料最多的时候.从发育阶段的分布情况看,1-2月龄断奶猪病料最多,阳性率也最高,为74.62%,其次是育肥猪,阳性率为62.5%。同时对20头PCV2阳性病猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、扁桃体及腹股沟淋巴结进行PCR检测,结果表明所有脏器都能检测出PCV2有6头猪,所有病猪都能在扁桃体和腹股沟淋巴结检测出PCV2,脾脏的阳性率为95%,较其它受检组织更适合作为PCV2的检测组织。选择10头典型的断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)病猪,无菌采集肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结等病料制作自家组织灭活苗疫苗。由于感染猪圆环病毒后,易造成免疫器官一些损伤,引起免疫抑制,因此将自家灭活苗配合抗生素对断奶仔猪进行效果试验验证,结果显示研制的猪圆环病毒自家组织灭活苗注射仔猪后,能有效提高断奶仔猪成活率,提高仔猪日增重,具有较好的安全性和保护性,试验表明用自家组织灭活苗疫苗配合抗生素对PMWS有非常显著的防制效果。对研制的防制猪圆环病毒2型自家灭活苗进行免疫效力研究,首先免疫断奶仔猪观察抗体消长规律,然后进行攻毒保护试验和临床应用试验。结果显示,免疫后的抗体消长规律符合抗体产生的动力学规律,从攻毒保护试验看出,攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常,免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低。病毒血.症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明灭活油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫猪体后能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。