二种微藻多糖和蛋白质的纯化及部分生物活性研究

二种微藻多糖和蛋白质的纯化及部分生物活性研究

论文题目: 二种微藻多糖和蛋白质的纯化及部分生物活性研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 植物学

作者: 陈晓清

导师: 郑怡

关键词: 紫球藻,海水小球藻,凝集素,多糖,抗菌蛋白

文献来源: 福建师范大学

发表年度: 2005

论文摘要: 分别从二种微藻一紫球藻和海水小球藻中分离纯化多糖、凝集素和抗菌蛋白,并对它们的一些特性进行了研究,结果如下:1. 紫球藻凝集素(PCL)是一种分子量为32.5 kD39.6 kD的糖蛋白,分子中含有28.4%的中性糖。在氨基酸组成中,缬氨酸的含量最高,其次是谷氨酸与甘氨酸,不含蛋氨酸、组氨酸、精氨酸和脯氨酸。PCL能凝集兔和猪的红细胞,能凝集4种单细胞藻类,还能够凝集中华根霉和甘薯薯瘟病病原菌以及经热处理的枯草芽孢杆菌和啤酒酵母。PCL的凝血活性可被某些单糖或二糖及胃粘蛋白所抑制,对热敏感,对酸碱处理有较好的稳定性,Ca2+、Mn2+、Zn2+能激活其被EDTA-Na2所抑制的活性。2. 海水小球藻凝集素(CPL)是一种分子量为63.9 kD-一70.3 kD的糖蛋白,分子中含有10.8%的中性糖。在氨基酸组成中,甘氨酸的含量最高,其次是谷氨酸与天冬氨酸,不含脯氨酸。CPL能凝集兔、山羊、鸡和猪的红细胞,能凝集5种单细胞藻类,还能够凝集大肠杆菌、甘薯薯瘟病病原菌、稻瘟病病原菌以及经热处理的变形杆菌。CPL的凝血活性能被某些单糖或二糖所抑制,对热、酸碱处理有较好的稳定性,Ca2+、Mn2+、Zn2+能激活其被EDTA-Na2所抑制的活性。3.从紫球藻中得到一种抗菌蛋白,在SDS-PAGE上显示2条带,分子量分别为2l kD与30 kD,氨基酸组成分析表明,此抗菌蛋白含17种氨基酸,尤富含谷氨酸、甘氨酸与天冬氨酸。纯化的蛋白对产黄青霉和甘蔗黑穗病病原菌有较强的抑制作用,对枯草杆菌和藤黄八叠球菌也有抑制作用,抗菌活性与温度变化有关。4.从海水小球藻中得到一种抗菌蛋白,在SDS-PAGE上显示2条带,分子量分别为61 kD与70 kD,氨基酸组成分析表明,此抗菌蛋白含17种氨基

论文目录:

Ⅰ 前言

1.微藻中的生物活性物质及研究进展

2.紫球藻的生物活性物质及研究进展

3.小球藻的生物活性物质及研究进展

Ⅱ 材料与方法

1.材料

1.1 实验材料

1.2 药品与试剂

1.3 主要仪器

2.方法

2.1 二种微藻凝集素的分离纯化及部分性质测定

2.1.1 二种微藻凝集素的分离与纯化

2.1.2 二种微藻凝集素的部分性质测定

2.2 二种微藻抗菌蛋白的分离纯化及性质分析

2.2.1 抗菌蛋白的活性检测

2.2.2 抗菌蛋白的分离纯化

2.2.3 抗菌蛋白的部分性质分析

2.3 二种微藻多糖的分离纯化及抗菌活性检测

2.3.1 多糖的分离纯化

2.3.2 部分理化性质分析

2.3.3 多糖提取物抗菌活性检测

Ⅲ 结果与分析

1.二种微藻凝集素的分离纯化及部分性质

1.1 二种微藻PBS提取液对血红细胞的凝集活性

1.2 二种微藻凝集素的分离与纯化

1.3二种微藻凝集素的部分性质测定

1.3.1中性糖含量测定

1.3.2 SDS-PAGE测定亚基分子量

1.3.3 凝胶过滤法测定相对分子量

1.3.4 氨基酸的组成

1.3.5 凝集素的凝集活性

1.3.6 糖和糖蛋白的抑制作用

1.3.7 金属离子对凝集素凝集活性的影响

1.3.8 温度稳定性

1.3.9 pH对凝集素活性的影响

2.二种微藻抗菌蛋白的分离纯化及性质

2.1 二种微藻蛋白质粗提液的抗菌活性

2.2 紫球藻藻红蛋白的分离纯化及纯度鉴定

2.3 海水小球藻抗菌蛋白的分离纯化及纯度鉴定

2.4 二种微藻抗菌蛋白的部分性质

2.4.1 亚基分子量

2.4.2 氨基酸组成

2.4.3 抗菌蛋白对细菌和真菌的抑制作用

2.4.4 抗菌蛋白的热稳定性

3.二种微藻多糖的分离纯化及抗菌活性

3.1 多糖的分离纯化

3.1.1 多糖的提取

3.1.2 多糖的纯化

3.1.3 多糖的纯度鉴定

3.2 部分理化性质

3.2.1 总糖含量

3.2.2 硫酸根含量

3.2.3多糖组成分析

3.3 多糖粗提物的抗菌活性

3.3.1海水小球藻与紫球藻多糖提取物抗细菌抗真菌活性

3.3.2最小抑菌浓度(MIC)

Ⅳ 讨论

参考文献

图版

中文摘要

致谢

发布时间: 2005-09-27

参考文献

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