导读:本文包含了克隆细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:体细胞克隆,地方猪,地方猪品种,四川省
克隆细胞论文文献综述
[1]（2019）在《四川省首批体细胞克隆地方猪诞生》一文中研究指出位于四川省巴中市的一个青峪猪原种场内,4头通过青峪猪体细胞克隆和胚胎移植技术受孕的母猪,近日顺利产下23头健康状况良好的纯种青峪猪仔猪。这是四川省首次将非基因编辑体细胞克隆技术运用于地方猪资源保护。据悉,被称为"巴中土猪"的青峪猪是四川省地方猪种,被列为四川省畜禽遗传资源保护名录。为加强对地方猪品种遗传资源的有效(本文来源于《农村百事通》期刊2019年23期）
傅雅娟,陈苏星,蔡少丽,林莉莉,林清强[2]（2019）在《从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体》一文中研究指出为研究环鸟苷酸-腺苷酸合成酶入核的机制,利用兔外周血B细胞筛选抗人cGAS蛋白单克隆抗体.针对已叁次免疫人cGAS(161-522)蛋白的新西兰兔,运用流式细胞术得到阳性效应B细胞,在单管里对单细胞裂解,得到总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增同一个B细胞来源的抗体重链和轻链可变区序列,抗体基因扩增成功率高达80%以上.293T重组表达兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体并鉴定,获得1个具有较好结合特异性的兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体,ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶10 000.(本文来源于《福建师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期）
蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽[3]（2019）在《人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究》一文中研究指出目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通路与肿瘤侵袭、耐药等功能表型密切相关。结论成功构建从形态、功能表型到基因背景具有显着差异的U87单克隆细胞株CF5、G11,为研究GBM异质性和基因功能奠定了基础。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2019年11期）
陈怡[4]（2019）在《中科院上海分院举办“拥抱科学”科学节活动》一文中研究指出今年是新中国成立70周年，也是中科院成立70周年。中科院上海分院日前组织沪区部分科研院所举办了主题为“拥抱科学”的中科院第二届科学节活动，活动分为内场和外场两部分举行。在岳阳路319号大院的明德厅里，中科院上海分院党组副书记、沪区党委副书记沈兆雷(本文来源于《上海科技报》期刊2019-11-08）
[5]（2019）在《四川首批体细胞克隆地方猪诞生》一文中研究指出日前,从四川农业大学获悉,位于巴中市的一个青峪猪原种场内,4头通过青峪猪体细胞克隆和胚胎移植技术受孕的母猪顺利产下23头健康状况良好的纯种青峪猪仔猪。这是四川首次将非基因编辑体细胞克隆技术运用于地方猪资源保护。据悉,被称为"巴中土猪"的青峪猪是四川省地方猪种,被列为四川省畜(本文来源于《农村新技术》期刊2019年11期）
陈竞,许汪,宋利娜,郝鹏飞,姜宇航[6]（2019）在《人IFN-λ1的克隆表达及其在不同种属细胞中的抗病毒活性分析》一文中研究指出目的测定IFN-λ1在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等4种不同种属来源细胞中的抗病毒活性。方法利用RT-PCR技术从人结直肠腺癌细胞(CaCo2)中扩增获得人IFN-λ1 (HuIFN-λ1)基因,然后克隆至真核表达载体pCDNA3.1-Flag-HA中,通过质粒转化、阳性菌落筛选、质粒提取及测序,获得重组质粒pCDNA3.1-HuIFN-λ1;利用脂质体将其转染293细胞,48 h后通过Western blot检测HuIFN-λ1瞬时表达情况,取转染后上清分别作用于CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等四种不同种属来源细胞进行HuIFN-λ1抗病毒活性分析。结果从人结直肠腺癌细胞中扩增获得HuIFN-λ1基因,大小为600 bp,并在293细胞内成功表达HuIFN-λ1,表达产物能抑制VSVG在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK中的增殖,流式细胞仪检测经HuIFN-λ1处理的上述细胞荧光率分别为73.69%、80.12%、71.73%、69.47%。结论重组表达的人IFN-λ1蛋白对4种不同种属来源的细胞均存在一定的抗病毒活性,为研究人IFN-λ1在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机制及其应用奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年10期）
王斌,殷实,熊显荣,秦文昌,黄向月[7]（2019）在《牦牛HDAC1基因克隆及其在组织和卵母细胞减数分裂过程中的表达研究》一文中研究指出旨在克隆牦牛组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)基因,并检测其在牦牛不同组织及卵母细胞减数分裂过程中的表达水平,从而为研究HDAC1在牦牛生殖发育中的作用机制提供理论依据。本试验采用牦牛为研究对象,通过RT-PCR技术获得牦牛HDAC1基因CDS序列,使用相关生物信息学软件分析其结构和功能,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HDAC1基因在牦牛脑、心、肌肉、卵巢、肾、脾、小肠、肝、肺和子宫组织中的表达谱及在卵母细胞减数分裂过程中mRNA的表达水平。结果表明,HDAC1基因开放阅读框为1 302 bp,编码433个氨基酸,与黄牛、山羊和绵羊的同源性较高;HDAC1基因在牦牛的各个组织中均有表达,其中在脾、肾和小肠中的表达量极显着高于其他组织(P<0.01)。在牦牛减数第一次分裂中期(MⅠ)和减数第二次分裂中期(MⅡ)卵母细胞中,HDAC1基因的表达水平极显着高于生发泡(germinal vesicle,GV)期(P<0.01)。提示,HDAC1基因参与牦牛卵母细胞减数分裂过程。本试验为进一步研究HDAC1基因在高寒、低氧环境下的牦牛生殖繁育中的作用提供了理论依据。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年10期）
邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文[8]（2019）在《山药V-ATPase B2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位》一文中研究指出ATP合成酶(V-ATPase)催化能源物质ATP的合成,从而保证细胞各项生命活动的能量供应。目前对山药(Dioscoreaopposita)生长发育相关差异表达基因的研究鲜有报道。本研究中通过分析ATP酶、V-ATPaseB2亚基基因对山药块茎膨大的影响,为进一步解析山药生长发育的分子调节机制提供试验依据与线索,并为山药块茎膨大提供候选基因。试验材料为毕克齐山药和大和长芋山药。在呼和浩特地区山药块茎在播后90 d左右开始膨大。在块茎膨大期间,每隔15d取1次样,即播后的105、120、135、150和165d进行取样,分别采集叶、茎和块茎。两个品种各选取3株作为生物学重复。使用RACE技术克隆了V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长;对其开放阅读框进行了生物信息学分析;克隆其gDNA;使用农杆菌介导法注射烟草叶片进行V-ATPase B2蛋白的亚细胞定位;对ATPase活性和V-ATPase B2亚基基因进行表达模式分析。通过全长克隆得到山药V-ATPase B2亚基基因的cDNA全长为1 874 bp,编码488个氨基酸,基因登录号为MK858181。该基因编码蛋白的理论分子量为54289.76,等电点为5.08;分子式为C2404H3824N654O741S17,总原子数为7640,亲水性的平均值为–0.268。通过gDNA的克隆,得到V-ATPase B2的编码区分为14个外显子,15个内含子。同源序列进化分析表明,山药与凤梨的亲缘关系最近。亚细胞定位表明山药V-ATPase B2蛋白定位于细胞质。通过ATP酶活性的测定与实时荧光定量PCR分析,得到两品种山药的ATPase活性和V-ATPaseB2相对表达量同时达到最高值。在山药块茎膨大中前期二者极显着正相关,而在成熟收获时则为极显着负相关,相关系数为–0.963(P<0.01)。说明V-ATPaseB2的表达水平影响着ATPase的活性。ATPase活性在叶中最高,而V-ATPase B2在块茎中表达量最高。从广义上讲,V-ATPase B2在山药块茎膨大过程中发挥着一定的作用,可进一步为山药生长发育提供候选基因。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21）
李静,岳锐,陈超,邓卫东,万九生[9]（2019）在《基因编辑和体细胞克隆技术在警犬繁育领域的研究现状与展望》一文中研究指出2018年12月19日,公安部昆明警犬基地获得了中国第一头克隆警用昆明犬“昆勋”,标志着国内首次实现了警用工作犬的体细胞克隆。本文简要综述克隆犬技术的研究现状并提出了结合应用基因编辑技术制备克隆犬的重要意义。体细胞克隆技术对于优良种畜复制、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育等方面具有重要意义。目前体细胞核移植技术已经成功地用于生产可存活的克隆幼犬,我国已经成为继韩国之后,第二个独立掌握犬克隆技术的国家。克隆犬的生长特征与自然受精而生的犬相似,后代其生长性能健康同时也能自然繁殖下一代。因此,克隆技术在家犬中可以作为保护濒危物种的辅助生殖技术、改善有价值的个体的繁殖性能以及生产疾病模型动物等方面的重要应用。(本文来源于《第19次全国犬业科技学术研讨会论文集》期刊2019-10-16）
刘国芳,刘晓志,高健,王志明[10]（2019）在《宿主细胞残留蛋白质对单克隆抗体药物质量影响及其质量控制》一文中研究指出以单克隆抗体药物(monoclonal antibodies,m Abs)为代表的生物制品药物销售在不断扩大,并呈现持续上升势头,m Abs的使用为疾病治疗提供了新策略。随着m Abs使用量增大,对产品质量提出了更高要求,随着宿主细胞表达m Abs水平的不断提高,宿主细胞蛋白(host cell proteins,HCP)含量也随之增加,上下游生产工艺面临不断挑战。HCP所含蛋白质异常复杂,虽然一些HCP可能会被降解,但残留HCP仍会引起药物临床使用中的不良反应,从而影响药物的安全性和有效性。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunesorbent assays,ELISAs)是目前HCP检测的重要方法之一,ELISAs可以定量检测药物中总HCP含量,但存在局限性。对正在开发的包括LC-MS/MS在内的多种分析方法进行HCP检测,将为药物工艺过程开发和验证提供更多依据。讨论了以CHO(Chinese hamster ovary,中国仓鼠卵巢)细胞系为宿主的m Abs生产中,HCP的质量控制及检测分析方法的研究进展。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年10期）
克隆细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为研究环鸟苷酸-腺苷酸合成酶入核的机制,利用兔外周血B细胞筛选抗人cGAS蛋白单克隆抗体.针对已叁次免疫人cGAS(161-522)蛋白的新西兰兔,运用流式细胞术得到阳性效应B细胞,在单管里对单细胞裂解,得到总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增同一个B细胞来源的抗体重链和轻链可变区序列,抗体基因扩增成功率高达80%以上.293T重组表达兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体并鉴定,获得1个具有较好结合特异性的兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体,ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶10 000.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
克隆细胞论文参考文献
[1]..四川省首批体细胞克隆地方猪诞生[J].农村百事通.2019
[2].傅雅娟,陈苏星,蔡少丽,林莉莉,林清强.从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体[J].福建师范大学学报(自然科学版).2019
[3].蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽.人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究[J].医学研究生学报.2019
[4].陈怡.中科院上海分院举办“拥抱科学”科学节活动[N].上海科技报.2019
[5]..四川首批体细胞克隆地方猪诞生[J].农村新技术.2019
[6].陈竞,许汪,宋利娜,郝鹏飞,姜宇航.人IFN-λ1的克隆表达及其在不同种属细胞中的抗病毒活性分析[J].中国病原生物学杂志.2019
[7].王斌,殷实,熊显荣,秦文昌,黄向月.牦牛HDAC1基因克隆及其在组织和卵母细胞减数分裂过程中的表达研究[J].畜牧兽医学报.2019
[8].邵盈,张艳芳,赵令敏,敖兰吉亚,霍秀文.山药V-ATPaseB2亚基基因的克隆、表达分析及亚细胞定位[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[9].李静,岳锐,陈超,邓卫东,万九生.基因编辑和体细胞克隆技术在警犬繁育领域的研究现状与展望[C].第19次全国犬业科技学术研讨会论文集.2019
[10].刘国芳,刘晓志,高健,王志明.宿主细胞残留蛋白质对单克隆抗体药物质量影响及其质量控制[J].中国生物工程杂志.2019