论文摘要
目的:用不同浓度的刺参粘多糖(SJAMP)作用于人宫颈癌细胞系Hela细胞,观察SJAMP对Hela细胞增殖分化的影响并初步探讨其可能的作用机制,为研究SJAMP的抗癌作用提供理论依据。方法:体外培养Hela细胞,将不同浓度的SJAMP作用于Hela细胞,分别进行以下的研究:(1)通过四甲基偶氮唑盐实验(MTT法)观察SJAMP对Hela细胞增殖的抑制作用;(2)光镜观察SJAMP作用下Hela细胞形态及数量的变化;电镜观察SJAMP作用下Hela细胞内超微结构的变化;(3)应用RT-PCR法检测cyclinD1、CDK4、C-myc的mRNA的表达。结果:(1)MTT法表明:不同浓度组SJAMP与对照组比较,OD值均明显降低(除0.5mg/ml组与对照组间P<0.05外其余组均P<0.01),随着浓度的增高,OD值降低的愈明显(P<0.01)。说明SJAMP能够有效抑制Hela细胞的增殖,并且这种抑制作用具有剂量依赖关系;(2)光镜显示SJAMP作用下,细胞数量变少,排列稀疏,体积瘦小,呈长梭形或圆形,说明SJAMP能够明显抑制Hela细胞的增殖,随着药物浓度的增大,作用时间的延长,SJAMP对Hela细胞增殖的抑制作用愈强。透射电镜显示SJAMP作用下细胞核浆比例减小,核小趋向规则形且核仁减少或消失,异染色质增多,胞质内出现分化良好的细胞器,说明SJAMP可诱导细胞向成熟细胞分化;(3)RT-PCR实验结果表明,与对照组比较,SJAMP可以明显降低cyclin D1、CDK4、C-myc的mRNA表达,并随着作用时间的延长和药物浓度的增大,降低的幅度越明显。结论:SJAMP对Hela细胞具有明显的生长抑制和诱导分化作用,其机制可能是通过抑制细胞周期因子cyclin D1和CDK4的表达从而抑制细胞增殖;通过抑制癌基因C-myc的表达来诱导Hela细胞分化。
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