论文摘要
目的完善原始卵泡的体外培养技术;探索原癌基因c-erbB2在大鼠原始卵泡启动生长过程中的表达变化及可能的作用。方法（1）选择2日龄SD大鼠,建立Waymouth和DMEM两种卵巢体外培养体系,用组织切片和HE染色法观察原始卵泡启动生长情况,用免疫组化和Western blot方法检测卵泡活化生长的重要标志物——增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况,以判断原始卵泡在两种培养体系中的生长状态,挑选出适合原始卵泡生长发育的体外培养体系。（2）用原位杂交、RT-PCR和免疫组化方法检测c-erbB2 mRNA和蛋白在原始卵泡启动生长中及在表皮生长因子（EGF）作用下的表达情况。（3）用Western blot方法同步测定p-ERK1/2蛋白在原始卵泡启动生长中及在EGF作用下的表达情况,并分析与c-erbB2 mRNA表达变化的相关关系。结果（1）经组织形态学的比较、各级正常卵泡数量的计算及PCNA表达情况的分析显示,原始卵泡在Waymouth培养体系中存活和生长情况优于DMEM培养体系;并观察到在Waymouth培养体系中加入50ng/ml EGF能进一步促进原始卵泡启动生长。（2）原位杂交结果显示,c-erbB2 mRNA在大鼠原始卵泡生长过程中均有表达,主要位于卵母细胞胞浆内,有随卵泡生长逐渐增加趋势;半定量RT-PCR结果显示,c-erbB2 mRNA表达在2日龄大鼠卵巢培养8d后与培养0d（对照组）相比显著增加（相对光密度值分别为0.297±0.018和0.178±0.011,P<0.05）,并在50ng/ml EGF作用下进一步增强;免疫组化结果显示,ErbB2蛋白在大鼠原始卵泡生长过程中均有表达,主要表达于卵母细胞胞膜上,也有随卵泡生长逐渐表达增强的趋势。（3）Western blot结果显示,磷酸化细胞外信号调节激酶1/2 （p-ERK1/2）也随卵泡发育其含量不断增加,在50ng/ml EGF作用下进一步增强。经Spearman相关分析表明,在原始卵泡启动生长过程中,p-ERK1/2含量的变化与c-erbB2 mRNA的表达变化呈显著的正相关关系（rs=0.900,P<0.05）。结论（1）建立了新生大鼠卵巢体外培养体系。（2）原始卵泡中有c-erbB2 mRNA及蛋白的表达,且随原始卵泡的启动生长过程表达增强,EGF在促进原始卵泡启动生长的同时,也使c-erbB2 mRNA及蛋白的表达增强,表明原癌基因c-erbB2在原始卵泡启动生长中起重要作用。（3）在原始卵泡启动生长中,p-ERK1/2含量的变化与c-erbB2 mRNA的表达变化非常一致,两者呈显著的正相关关系,ERK-MAPK信号通路可能在介导原癌基因c-erbB2调控原始卵泡生长中起作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].原癌基因c-erbB_2在原始卵泡启动生长中的作用[J]. 中国应用生理学杂志 2010(02)
- [2].上皮性卵巢癌中C-erbB_2、ER及PR的表达及其意义[J]. 中国临床医学 2009(03)
- [3].c-erbB_2在大鼠卵巢中的表达及其在原始卵泡生长启动中的作用[J]. 生理学报 2009(05)
- [4].C-erbB_2、p53基因在卵巢癌组织中的表达及临床意义[J]. 海南医学院学报 2013(07)
- [5].原癌基因c-erbB_2和c-myb经丝裂原活化蛋白激酶和成熟促进因子途径调节卵母细胞的成熟[J]. 生理学报 2008(01)
- [6].MAPK/PKC信号通路在原癌基因c-erbB_2调控原始卵泡启动生长中的作用[J]. 生理学报 2009(05)
- [7].649例蒙古族患者乳腺癌ER、PR、C-erbB_2、P~(53)、PCNA的表达及预后分析[J]. 中国医药导刊 2008(09)
- [8].卵巢癌中C-erbB_2、p53基因表达及临床意义[J]. 海南医学院学报 2012(05)
- [9].检测胃黏膜上皮细胞微量元素、DNA、P_(53)、Ki-67、C-erbB_2、P21~(ras)研究中医脾虚证和胃癌前病变的关系[J]. 辽宁中医杂志 2019(02)
标签：原始卵泡论文; 启动生长论文; 表皮生长因子论文; 增殖细胞核抗原论文; 磷酸化细胞外信号调节激酶论文;