蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠细胞凋亡及相关蛋白、基因表达影响的研究

论文摘要

目的:观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法:采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉（MCAO）,制备局灶性脑缺血模型,观察PAMD对MCAO模型大鼠脑缺血后24h、48h、72h神经功能缺损导致的行为学变化,通过HE染色及透射电镜观察病理形态学变化,并以免疫组化法检测其对上述三个时间点大脑皮质细胞凋亡相关蛋白HSP70、PKB、c-fos、p53表达的影响,此外还通过流式细胞仪检测PAMD对脑缺血后24h大脑皮质细胞凋亡率的影响,RT-PCR法检测其对脑缺血后24h大脑皮质细胞凋亡相关基因Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗细胞凋亡及对脑缺血的神经保护作用。结果:PAMD能明显改善神经功能缺损的症状和脑缺血组织的病理形态学变化,降低缺血脑组织的凋亡率,抑制MCAO模型大鼠大脑皮质c-fos、p53蛋白表达,促进HSP70、PKB蛋白表达及提高缺血脑损伤后大脑皮质神经元Bcl-2 mRNA表达水平,降低Bax mRNA表达水平。结论:PAMD对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机理可能与PAMD抑制缺血脑组织细胞凋亡及影响凋亡相关基因的表达有关。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献综述
• 1 祖国医学对中风病的认识
• 1.1 病名
• 1.2 病因病机
• 1.3 辩证施治
• 2 现代医学对缺血性脑损伤的认识
• 2.1 现代医学对缺血性脑损伤分子机制的认识
• 2.2 缺血性脑血管病西药临床研究现状
• 3 脑缺血模型制作方法
• 3.1 全脑缺血模型
• 3.2 局灶性脑缺血模型
• 3.3 其它脑缺血模型
• 4 蝙蝠葛酚性碱现代药理研究
• 实验部分
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验设备
• 1.3 实验试剂及药品
• 2 实验过程
• 2.1 PAMD对MCAO模型大鼠神经功能缺损的影响
• 2.2 PAMD对MCAO模型大鼠脑组织病理学变化的影响
• 2.3 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质细胞凋亡率的影响
• 2.4 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关蛋白表达的影响
• 2.5 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关基因表达的影响
• 3 统计学分析
• 实验结果
• 1 PAMD对给药前后各组大鼠神经功能缺损的影响
• 2 PAMD对MCAO模型大鼠脑组织病理学变化的影响
• 2.1 HE染色观察
• 2.2 透射电镜观察
• 3 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质细胞凋亡率的影响
• 4 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关蛋白表达的影响
• 4.1 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质HSP70蛋白表达的影响
• 4.2 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质PKB蛋白表达的影响
• 4.3 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质c-fos表达的影响
• 4.4 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质p53表达的影响
• 5 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关基因表达的影响
• 5.1 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质Bcl-2 mRNA表达的影响
• 5.2 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质Bax mRNA表达的影响
• 5.3 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质Bcl-2/Bax相对表达量的影响
• 讨论
• 1 动物模型的选择
• 1.1 实验动物的选择
• 1.2 模型制备方法的选择
• 2 PAMD对缺血大鼠脑组织病理学变化的影响
• 3 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质细胞凋亡率的影响
• 4 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关蛋白表达的影响
• 4.1 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质HSP70蛋白表达的影响
• 4.2 PAMD对MCAO模型大鼠大脑皮质PKB蛋白表达的影响
• 4.3 PAMD对MCAO蛋白大鼠大脑皮质c-fos表达的影响
• 4.4 PAMD对MCAO大鼠大脑皮质p53表达的影响
• 5 PAMD对MCAO模型大鼠凋亡相关基因表达的影响
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读博士学位期间发表的论文
• 个人简历