组织工程人工骨修复股骨头坏死骨缺损的实验研究

论文题目: 组织工程人工骨修复股骨头坏死骨缺损的实验研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 外科学

作者: 周茂生

导师: 齐新生

关键词: 股骨头坏死,骨缺损,组织工程,骨小梁体积,双相磷酸钙陶瓷,成骨细胞

文献来源: 东南大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:通过体外分离、培养新生家兔成骨细胞(OBs),在体外与羟基磷灰石/三磷酸钙陶瓷复合载体(HA/β-TCP)复合培养后,植入股骨头坏死骨缺损的动物模型体内,以观察组织工程人工骨对股骨头坏死骨缺损的修复作用。方法:植块法/胶原酶消化法分离、培养新生24小时家兔成骨细胞,取第三代成骨细胞与HA/β-TCP在体外复合培养;14只成年家兔(28髋)用开槽、95%酒精腐蚀法造成双侧股骨头坏死骨缺损模型,28髋随机分为A组空白对照组(自然修复组),B组单纯HA/β-TCP植入组,C组组织工程人工骨植入组。即刻植入组织工程化人工骨。术后4、8、12周作X线、CT检测、HE染色、测量12周X线片骨缺损面积,原缺损区新生骨小梁体积(TVB)计量形态学分析,进行统计学处理,了解股骨头骨缺损修复情况。结果:植块法和胶原酶法分离培养成骨细胞均获成功,第三代成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)染色阳性;成骨细胞与HA/β-TCP在体外复合后,继续增殖、分裂并分泌骨基质,扫描电镜检查显示HA/β-TCP表面及孔隙内均有大量细胞生长,并有骨基质分泌。术后X线及CT检测:人工骨组4周时见植入人工骨高密度影,周围有透光区,与单纯材料组无明显区别。8周时人工骨影缩小,透光区影模糊。12周充填区密度与周围骨质基本一致,看不到骨缺损的透光影。未出现股骨头塌陷或关节间隙狭窄等骨性关节炎的表现;空白对照组部分出现股骨头塌陷、关节间隙狭窄。HE染色组织切片观察:人工骨组术后4周缺损区中部为人工骨,周边出现反应带,有软骨性骨痂形成;术后8周周边新骨带明显增宽,材料渐降解;植入后12周充填区广布较成熟的骨小梁,但较正常骨小梁粗、部分呈板层状或编织状骨小梁,材料大部分降解。12周骨缺损面积、原缺损区新生骨小梁体积(TBV) C组与B组(P<0.05)、A组(P<0.01)比较,有明显统计学差异。随时间延长,人工骨组TBV增加(P<0.05)。结论:体外分离、培养成骨细胞,与HA/β-TCP复合构建组织工程化人工骨获取成功,HA/β-TCP具有良好的组织细胞相容性、骨引导性、骨诱导性;开槽挖取股骨头内松质骨、95%酒精腐蚀法制造股骨头坏死骨缺损动物模型,可引起类似于人股骨头坏死的病理改变,可用于股骨头坏死的实验研究;组织工程人工骨植入可促进股骨头坏死骨缺损的修复,防止股骨头塌陷。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

文献综述

材料与方法

一、成骨细胞来源

二、成年家兔

三、 HA/β-TCP

四、试剂

五、材料与仪器

六、方法

结果

一、兔成骨细胞的体外分离培养

二、成骨细胞的鉴定

三、成骨细胞与 HA/β-TCP 复合培养 SEM 观测

四、动物实验术后一般观察

五、术后 X 线检查

六、 CT 检测

七、 12 周骨缺损面积的测量结果

八、病理学观测

九、骨形态计量学分析结果

讨论

一、骨细胞的体外分离培养

二、成骨细胞与 HA/β-TCP 支架材料的体外复合培养

三、股骨头坏死模型的制作

四、组织工程人工骨对股骨头坏死骨缺损的修复作用

结论

致谢

参考文献

作者简介

发布时间: 2007-06-11

参考文献

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