温下方抑瘤作用及诱导肠癌细胞凋亡的机制研究

论文题目: 温下方抑瘤作用及诱导肠癌细胞凋亡的机制研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 方剂学

作者: 季旭明

导师: 段富津

关键词: 温下方,肠癌,抑瘤,细胞凋亡,机制研究

文献来源: 黑龙江中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的本课题通过实验研究,对温下方药的抑瘤作用,诱导肠癌细胞凋亡作用及相关机理进行深入探讨,以期为临床治疗肠癌提供新思路及有效方药。方法体内实验研究,应用移植性肿瘤模型,进行抑瘤、增效、减毒、增强免疫功能及相关机制的研究;体外实验,运用血清药理学方法,及MTT、FCM、LSCM技术,检测含药血清对细胞生长的抑制作用,又从形态学观察、周期分析、凋亡率检测、凋亡调控蛋白表达、细胞内钙浓度及线粒体膜电位检测几方面进行温下方含药血清诱导肠癌细胞凋亡及其作用机制的研究。结果提出中医防治大肠癌的基本思路,重视温下法的合理运用;体内实验结果表明温下方有明显的抑瘤、减毒作用,抵抗化疗药物所致免疫器官萎缩,增加血清中免疫细胞因子IL-6及TNF-α含量;体外细胞培养实验结果表明,温下方含药血清作用24小时,明显抑制肠癌细胞生长,形态学观察可见明显的凋亡细胞,肠癌细胞凋亡率显著增高,肠癌细胞明显阻滞于S期,可上调抑癌基因p53表达,下调原癌基因Bcl-2表达,增加细胞内钙浓度,降低线粒体膜电位。结论温下法可用于肠癌的治疗,温下方具有明显的抑瘤作用,与化疗药配伍有减毒之功,并能增强机体免疫力;对肠癌细胞有明确的诱导凋亡作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期,调节基因的表达,增加细胞内钙浓度,降低线粒体膜电位的表达有关。

论文目录:

英文缩略词表

中文摘要

ABSTRACT

前言

第一部分文献综述

一祖国医学对肠癌的认识

(一) 祖国医学对肠癌病因病机的认识

(二) 祖国医学对肠癌治则治法及防治方药认识

二中药抗肠癌的实验研究现状及展望

(一) 单味药及有效成分抗肠癌的实验研究

(二) 中药复方抗肠癌的实验研究

三现代医学对肠癌的认识

(一) 肠癌的病因及发病机制研究

(二) 肠癌的诊断及临床治疗

第二部分实验研究

一温下方体内抑瘤作用及相关机制研究

(一) 一般资料

(二) 实验方法和结果

实验一温下方对体内肿瘤的抑制作用

实验二温下方与化疗药合用的增效作用

实验三温下方对化疗药所致血细胞下降的拮抗作用

实验四温下方对免疫器官和细胞因子的影响

二温下方含药血清诱导肠癌细胞凋亡及相关机制研究

(一) 一般资料

(二) 实验方法与结果

实验一含药血清对肠癌细胞的抑制作用

实验二肠癌细胞凋亡的形态学观察

2.1 光学显微镜形态观察

2.2 吖啶橙染色形态观察

2.3 流式细胞仪进行形态学分析

实验三肠癌细胞凋亡率检测

3.1 PI单染检测细胞凋亡率

3.2 AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡率

实验四含药血清对肠癌细胞周期的影响

实验五含药血清对调控蛋白Bcl-2、p53的影响

实验六含药血清对肠癌细胞内钙浓度的影响

实验七含药血清对肠癌细胞线粒体膜电位的影响

第三部分讨论

一中医防治肠癌的基本思路

(一) 防治并举，防重于治

(二) 标本兼顾，祛邪寓扶正之中

(三) 以通为要，辨寒温以施下法

(四) 习古鉴今，重视温下法的合理运用

二温下方组方依据及配伍意义

(一) 温下方所治肠癌病因病机分析

(二) 温下方剂的源流发展

(三) 温下方组方配伍意义

三移植性肿瘤模型在肿瘤研究中的应用

四温下方对免疫功能的影响

五肠癌细胞凋亡检测方法探讨

六温下方诱导肠癌细胞凋亡作用机制分析

七诱导细胞凋亡在肠癌治疗中的应用及意义

八血清药理学实验方法商榷

结论

致谢

参考文献

附录

发布时间: 2005-09-15

温下方抑瘤作用及诱导肠癌细胞凋亡的机制研究

猜你喜欢