活血补肾法调控慢性盆腔炎模型大鼠抗炎抗氧化及细胞凋亡相关机制的实验研究

论文摘要

目的:通过观察慢性盆腔炎模型大鼠血清、子宫组织中炎症细胞因子、抗氧化相关指标及细胞凋亡的变化,探讨活血补肾法治疗慢性盆腔炎（CPID）的抗炎、抗氧化及细胞凋亡机制。方法:以Wistar雌性大鼠为实验对象,采用混合细菌加机械损伤方法,复制慢性盆腔炎动物模型。将56只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、盆腔炎颗粒大、中、小剂量组及盆炎净颗粒组,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血清的炎症细胞因子水平,包括白介素-6（IL-6）、白介素-4（IL-4）及黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）、硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）;大鼠子宫形态学观察后,免疫组织化学法S-P法检测各组大鼠子宫组织Caspase-3的表达;逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠子宫组织Fas/FasLmRNA和p53mRNA的表达。结果:慢性盆腔炎模型大鼠血清前炎症细胞因子IL-6水平较正常组大鼠升高,抗炎症细胞因子IL-4水平较正常组大鼠降低,血清中抗氧化相关指标SOD较正常对照组大鼠降低,MDA较正常对照组升高,慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中Caspase-3、Fas/FasLmRNA和p53mRNA的表达较正常组大鼠升高,差异均有极显著性（P<0.01）。药物干预后,各治疗组大鼠血清前炎症细胞因子IL-6水平较模型组下降,抗炎症细胞因子IL-4水平则均较模型组升高;血清中SOD的含量较模型组显著升高（P<0.01）,血清中MDA含量较模型组显著降低（P<0.01）,盆腔炎颗粒各组血清中SOD及MDA浓度相关系数为﹣0.798,呈显著负相关性（P<0.01）。各治疗组大鼠子宫组织中Caspase-3、Fas/FasLmRNA和p53mRNA的表达与模型组相比较均增强（P<0.05）。其中,盆腔炎颗粒大剂量组IL-6、IL-4及SOD和MDA水平均已接近正常对照组水平（P>0.05）。除IL-6和Caspase-3外,盆腔炎颗粒大剂量组的作用均明显优于盆炎净颗粒组（P<0.01）。除IL-4外,盆腔炎颗粒中、大剂量组效果优于盆腔炎颗粒小剂量组（P<0.05）。盆腔炎颗粒各剂量组子宫组织FasmRNA及FasLmRNA表达相关系数为0.894,呈显著正相关性（P<0.01）。结论:活血补肾法通过对慢性盆腔炎模型大鼠血清炎症细胞因子、抗氧化相关指标的调节,使机体恢复免疫平衡,有效抑制慢性盆腔炎模型大鼠炎症,加快清除自由基,减少脂质类物质的堆积,从而减轻盆腔内组织器官的慢性损伤。活血补肾法通过增强慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中相关凋亡指标的表达,诱导炎细胞凋亡,抑制炎细胞生长,从而减轻炎症反应。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 研究背景
• 一、中医学对慢性盆腔炎的认识
• （一） 关于本病的古今源流记载
• （二） 现代中医学对本病病因病机的认识
• 二、西医学对慢性盆腔炎病理机制的认识
• （一） 炎症反应的免疫相关机制
• （二） 慢性盆腔炎粘连形成的病理机制
• （三） 抗氧化与慢性盆腔炎
• （四） 细胞凋亡机制与慢性盆腔炎
• 三、导师诊治慢性盆腔炎主要学术思想
• （一） 慢性盆腔炎血瘀肾虚证的形成
• （二） 活血补肾法治疗慢性盆腔炎探讨
• （三） 灵活运用活血补肾法治疗慢性盆腔炎
• 四、导师前期慢性盆腔炎科研成果
• 第二部分 实验研究
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 实验条件
• （三） 实验试剂
• （四） 实验仪器
• （五） 实验器械和材料
• （六） 实验药物
• 二、实验方法
• （一） 预实验
• （二） 实验模型复制方法
• （三） 实验动物分组及给药方法
• （四） 实验取材方法
• （五） 实验检测指标
• （六） 实验光镜切片制备方法
• （七） 大鼠子宫组织相关指标免疫组化S-P 法检测
• （八） 大鼠血清中相关指标的酶联免疫吸附法检测
• （九） 大鼠血清中SOD 的黄嘌呤氧化酶法测定
• （十） 大鼠血清中MDA 的硫代巴比妥酸法测定
• （十一） 各组大鼠子宫组织相关指标逆转录-聚合酶链反应法检测
• （十二） 统计方法
• 三、实验结果
• （一） 预实验结果
• （二） 实验大鼠组织形态学观察
• （三） 实验各组大鼠指标检测结果
• 第三部分 讨论
• 一、慢性盆腔炎大鼠动物模型的建立
• 二、盆腔炎颗粒的组方依据及方药分析
• 三、盆腔炎颗粒主要药物的现代药理学研究
• 四、本研究涉及的各指标在慢性盆腔炎中的作用
• （一） 炎症细胞因子在慢性盆腔炎中的免疫调节作用
• （二） 抗氧化在慢性盆腔炎中的作用
• （三） 细胞凋亡在慢性盆腔炎中的作用
• 五、活血补肾法调控慢性盆腔炎模型大鼠抗炎、抗氧化及细胞凋亡机制的探讨
• （一） 活血补肾法对慢性盆腔炎模型大鼠炎症细胞因子的影响
• （二） 活血补肾法对慢性盆腔炎模型大鼠抗氧化的影响
• （三） 活血补肾法对慢性盆腔炎模型大鼠细胞凋亡的影响
• 结语
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 查新报告
• 攻读博士学位发表学术论文
• 附件
• 详细摘要