论文摘要
动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）所致的心血管疾病、脑血管疾病是目前危害人类生命健康最严重的疾病之一。目前,AS、冠心病、脑中风等心、脑血管疾病的发病率和死亡率逐年上升,而且有低龄化的趋势,会导致出现各种严重心脑血管突发事件,患者预后差,严重影响生存及生活质量。如何防治心脑血管疾病的发生发展,已是我们医务工作者迫在眉睫的任务。心、脑血管疾病的共同病理基础是AS。因此,防治心、脑血管疾病,关键是防治AS。长期高脂饮食以及脂代谢紊乱与多种心血管疾病的发病有关。高脂血症为动脉粥样硬化形成重要独立危险因素,高脂血症会损伤血管内皮,内皮功能紊乱是心血管疾病的标志,许多心血管疾病危险因素与内皮依赖的血管舒张功能削弱有关,主要通过氧化应激的增加介导。在动脉粥样硬化、心力衰竭、糖尿病过程中血管组织中超氧化物增加,内皮舒缩调节功能受损,体内抗氧化增强。炎症及氧化应激和炎症介入早期动脉粥样硬化形成,心血管疾病病理过程中出现氧化应激可导致血管内皮细胞凋亡。个体体内脂质过氧化物的最终产物是丙二醛（MDA）,直接反应体内过氧化速率和强度。SOD是体内抗氧化酶,具有抗氧化作用,调节体内超氧化物水平,抑制血管舒缩功能障碍。细胞内SOD（ecSOD）与缺血性心脏病密切相关。髓过氧化物酶（MPO）为血红素过氧化物酶超家族成员之一,是氧化应激的一个主要标志物,通过消耗舒张血管的NO,引起血管收缩和内皮功能紊乱。NO的消耗会导致血管功能障碍,促进动脉粥样硬化的发生、发展。中药防治AS的研究已取得了很大进展,且具有毒副作用小、多层次、多环节、多靶点的良性调节的作用,探索有效的中药制剂可成为防治动脉粥样硬化的有效途径之一。因此笔者采用高脂饮食建立动脉粥样硬化家兔模型,探讨补心通脉颗粒对动脉粥样硬化家兔氧化应激的干预作用及机制,为补心通脉颗粒广泛的应用于临床治疗提供支持。目的：采用高脂饲料诱发青紫兰家兔动脉粥样硬化模型,给予辛伐他汀和不同剂量的补心通脉颗粒治疗,观察各组试验动物的血脂、血浆一氧化氮（nitric oxide, NO）、髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）主动脉丙二醛（malonaldehyde,MDA）、超（过）氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的变化情况。初步探讨补心通脉颗粒对动脉粥样硬化家兔氧化应激的影响。方法：采用高脂饲料诱发家兔动脉粥样硬化模型。将40只家兔随机分为5组,即：正常组、模型组、补心通脉低剂量组、补心通脉高剂量组和辛伐他汀组。正常组喂普通颗粒兔饲料。造模动物给予辛伐他汀或不同剂量的补心通脉颗粒治疗3个月后,从家兔的耳缘静脉抽取5ml血液,室温静置1小时后,3000转/分离心5分钟,分离血清置-20℃冰箱保存,待行血脂检测。然后注入苯巴比妥50mg·kg-1处死剥离颈部皮肤及肌肉组织,取得颈动脉,用PBS反复冲洗,尽量剥离外膜组织,纵行剥开,用4%福尔马林固定后,蒸馏水反复漂洗干净,在干燥的空气中晾干后,将血管组织剪成1cm大小,用强力膜固定在载玻片上自然晾干待测。常规方法检测血清TC、TG、LDL-c、HDL-c水平,采用比色法测定血浆和组织NO浓度,MPO用邻连茴香胺法,MDA用硫代巴比妥酸法,并检测组织SOD水平。统计学分析：所有数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析。定量数据以均数±标准差（x±s）表示。多组间比较用单因素方差分析,组间多重比较根据组间方差齐同性检验,分别选取不同的方法,按0.05的检验水准,若方差齐同则采用LSD检验,若方差不齐,则选用Tamhane’s T2检验。P≤0.05认为有统计学意义。结果：1.血脂改变经高脂饲料喂养12周后,与正常组相比,模型组家兔血清TC、TG、LDL-c均有不同程度的增高（P<0.01）,HDL-c水平下降（P<0.05）,差别都有统计学意义。TC、TG、LDL、HDL-c水平,补心通脉颗粒低、高剂量组和辛伐他汀组与正常组比较差异无统计学意义（P=0.147,P=0.862,P=0.285）,（P=0.076,P=0.410,P=0.639）,（P=0.158,P=0.178,P=0.440）,（P<0.053,P=0.856,P=0.919）。与模型组比较,补心通脉颗粒低、高剂量组和辛伐他汀组家兔的血清TC、TG均有下降（P<0.05）；与模型组比较,补心通脉颗粒高剂量组HDL-c比较差别有统计学意义（P<0.01）。补心通脉颗粒低剂量组家兔的血清LDL-c、HDL-c与模型组相比差别无统计学意义（P=0.158,P=0.053）。2.颈动脉病理改变正常组家兔血管未见明显脂质沉积,平滑肌未见增生,内膜完整,未见斑块出现。模型组所有家兔颈动脉内膜增厚,内皮下有多量脂质沉积,几乎绕动脉壁全周,但厚薄不等。辛伐他汀组血管管壁轻度脂质沉积,平滑肌未见明显增生。补心通脉低剂量组和高剂量组均管壁轻度脂质沉积,平滑肌可见增生。3.血浆NO、MPO改变家兔经高脂饮食造模12周后,血浆NO水平模型组低于对照组有统计学意义（P<0.001）；而辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组与对照组差异无统计学意义（P=0.123,P=0.062 P=0.058）。辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组血浆NO浓度高于模型组有统计学意义（P<0.01）。补心通脉颗粒高、低剂量组血浆NO浓度与辛伐他汀组之间差异无统计学意义（P=0.733,P=0.708）。血浆MPO水平模型组高于对照组（P<0.001）；而辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组与对照组差异无统计学意义（P=0.465,P=0.061 P=0.493）。辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组血浆MPO浓度低于模型组有统计学意义（P<0.01）。补心通脉颗粒高剂量组与辛伐他汀组之间差异无统计学意义（P=0.963）,补心通脉颗粒低剂量组较补心通脉高剂量组和辛伐他汀组升高有统计学意义（P<0.05）。4.颈动脉SOD、MDA改变高脂饮食喂养家兔造模12周后,模型组SOD水平低于对照组有统计学意义（P<0.05）；而辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组与对照组间差异无统计学意义（P=0.477,P=0.163,P=0.115）；辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组SOD水平均高于模型组有统计学意义（P<0.01或P<0.05）；补心通脉颗粒高、低剂量组与辛伐他汀组间差异无统计学意义（P=0.368,P=0.480）。高脂饮食喂养家兔造模12周后,模型组MDA水平高于对照组有统计学意义（P<0.001）；而辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组与对照组间差异无统计学意义（P=0.304,P=0.187,P=0.054）；辛伐他汀组、补心通脉颗粒高、低剂量组MDA水平均低于模型组有统计学意义（P<0.01）；补心通脉颗粒高、低剂量组与辛伐他汀组间差异无统计学意义（P=0.758,P=0.336）。结论：1.高脂饲料喂养12周后,家兔TG、TC、LDL-c显著增高,HDL-c水平下降,病理显示家兔颈动脉内膜增厚,内皮下有多量脂质沉积,几乎绕动脉壁全周,但厚薄不等,成功复制动脉粥样硬化家兔模型；2.模型组家兔血浆NO、颈动脉SOD下降,血浆MPO、颈动脉MDA水平升高；3.补心通脉颗粒可降低家兔TG、TC,升高HDL-c。改善颈动脉病理变化,提高血浆NO、颈动脉SOD水平,降低血浆MPO、颈动脉MDA水平；4.补心通脉颗粒抗动脉粥样硬化的作用与降低血脂,提高血浆NO、颈动脉SOD水平,降低血浆MPO、颈动脉MDA水平有关。