论文摘要
目的：自体移植法复制子宫内膜异位症大鼠模型(Endometriosis EMT),观察复方莪术胶囊(Compound Rhizoma Curcumae Capsule, CRCC1对EMT模型大鼠在位和异位内膜组织形态学和微血管密度(Micro vessel density, MVD)的影响；同时观察CRCC对EMT大鼠血清及腹腔液中血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)和内皮抑素(Endostatin, ES)的影响：从抗血管生成的角度探讨复方莪术胶囊的治疗机理,为复方莪术胶囊的临床应用提供更多的实验依据。方法：选取健康雌性Wistar大鼠45只,采用不检测动情期、自体移植的方法建立子宫内膜异位症大鼠模型,建模4周后二次剖腹,根据模型情况选择纳入与排除,将成膜无差别的大鼠随机分为4组：复方莪术胶囊高剂量组(HCRCC),复方莪术胶囊低剂量组(LCRCC)、孕三烯酮组及模型对照组,同时设置正常对照组和假手术组。分别给药4周后,第三次剖腹,检测移植物体积和重量,光镜下观察组织形态,免疫组化观察大鼠在位内膜和异位内膜MVD的表达。采取大鼠血清和腹腔液后用酶联免疫吸附法(ELISE法)测血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(ES)含量。实验结果采用SPSS17.0统计软件进行统计分析,治疗前后的比较采用t检验,多组之间的分析比较采用完全随机设计方差分析，组间均值两两比较用Student—Newman—Keuls(SNK)法。以P<0.05为有统计学意义；P<0.01为有显著统计学意义。结果：1、造模4周后第2次剖腹证实：不检测动情期、自体移植法建立EMT大鼠模型的成模率为78%。生长良好的异位病灶表现为隆起的囊泡结构,内为积液,表面有血管走行。病理学检查可见子宫内膜上皮细胞,腺体和间质。第2次剖腹(建模后4周),各组移植物体积与模型对照组相比无明显差异(P>0.05)。分组给药4周后,第3次剖腹各CRCC给药组移植物体积缩小,与第2次剖腹时相比,差异有显著性意义(P<0.01)；与模型对照组第3次剖腹时相比,有显著统计学差异(P<0.01)。CRCC用药组移植物重量与模型对照组相比有显著统计学差异(P<0.01)。与孕三烯酮组相比无明显差异(P>0.05)。2、从组织形态学来看,相对于模型对照组,各用药组异位内膜组织可见不同程度萎缩,腺体数目渐少且面积缩小,被覆上皮变薄,上皮细胞呈低柱状甚至扁平状松散排列,间质细胞明显渐少,血管数目渐少。HCRCC组在位内膜腺体数目、面积以及腺上皮细胞和间质细胞的形态与正常大鼠相比无明显改变。3、各组大鼠在位内膜MVD无明显差异(F=2.019,P=0.096),各组大鼠异位内膜组织MVD有明显差异(F=19.967,P=0.000)。组间比较,模型对照组异位内膜MVD高于正常对照组(P<0.05)o HCRCC组和孕三烯酮组MVD明显低于模型对照组,差异中有统计学意义(P<0.01),HCRCC组与孕三烯酮组之正间比较,差异无统计学意义(^=0.887)。LCRCC组与模型对照组之正间比较,差异无统计学意义(P=0.110)。4、模型对照组血清及腹腔液中VEGF的表达较空白对照组增强(P<0.01)；各给药组血清中VEGF的表达低于模型对照组(P<0.01),而各治疗组之正间比较,无统计学意义(P>0.05)。腹腔液中VEGF, HCRCC组和孕三烯酮组均低于模型对照组(P<0.01),二者之间比较无统计学意义(P=0.895)。模型对照组血清中ES的表达明显高于正常对照组(P=0.023)；而各治疗组与模型对照组比较,有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05)。各组腹腔液中ES的检测无意义。模型组大鼠血清和腹腔液中VEGF/ES均高于正常大鼠(P<0.05),且高于HCRCC组和西药对照组(P<0.05)；与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HCRCC组和西药对照组之间比较无统计学意义(P>0.05)结论：1、CRCC可抑制大鼠子宫内膜异位症的发展,减小移植物体积和重量,减轻腹腔粘连,改善异位内膜组织病理学变化,其中以HCRCC组作用明显。2EMT大鼠异位内膜和在位内膜中MVD均高于正正常大鼠,高剂量CRCC可减少EMT大鼠异位内膜中的MVD,对在位内膜MVD无明显影响。3.EMT大鼠血清和腹腔液中确实存在血管生成调控因子的失衡,表现为VEGF含量升高,VEGF/ES值升高。CRCC可以降低EMT大鼠血清和腹腔液中VEGF含量,并可调低VEGF/ES值。以HCRCC组作用明显,HCRCC组与正常对照组比较,无明显差异,说明CRCC不影响正常血管生成。
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