南阳地区鸡大肠杆菌病原分离、鉴定及综合防治的研究

论文摘要

鸡大肠杆菌病是严重危害养鸡业的一种重要的细菌性传染病。据对南阳地区主要养鸡集中区及兽医门诊的调查,规模养鸡场疫病的发生以大肠杆菌居首位。由于其血清型复杂,耐药菌株不断增加,给防治工作带来了巨大困难。为此,本研究首先从南阳地区发病鸡群中分离出致病性大肠杆菌,对其耐药性和毒力因子进行了初步调查,在此基础上进行了疫苗和药物防治研究并对南阳地区鸡大肠杆菌病的综合防制措施进行了讨论。从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜检及生理生化鉴定,分离出29株鸡致病性大肠杆菌。有14株分离株被鉴定出血清型,其中O1（4株）,O2（3株）,O78（7株）,未定型15株,O1、O2和O78血清型占分离株总数的48.3%。用29株分离菌株接种供试雏鸡后,发病症状及剖检病变均符合本病特征,其中高致病性菌株有13株,中度致病菌株有9株,低致病性菌株有7株,分别占试验菌株总数的44.8%,31%,24.2%。采用Kirby-Bauer纸片法,用22种药敏纸片对29株分离菌进行药敏试验,结果表明,分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍,仅对头孢噻圬、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高。PCR检测13株高致病性大肠杆菌的6种毒力因子,iss（92.31%）、iucD（76.92%）和irp2（61.54%）三种毒力因子出现的频率较高,其次是tsh（46.15%）、vat（23.08%）和astA（23.08%）,基因表型iss/iucD/irp2可以作为致病性大肠杆菌的毒力标志。选自临床分离的高致病性菌株制备大肠杆菌自家灭活苗,结合其它预防措施,用于易感群后发病率显著下降;而对于发病鸡群,配以敏感药物,辅以中药“菌消散”进行治疗,也取得了理想效果。本研究对大肠杆菌的分离和鉴定为摸清南阳地区大肠杆菌的流行病学打下了基础,对分离菌株进行的耐药性试验以及毒力分析为临床治疗提供了依据,疫苗和药物预防治疗试验则为南阳地区禽大肠杆菌病的防治积累了经验并具有重要的指导意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 鸡大肠杆菌病研究进展
• 1 病原学
• 1.1 形态特征
• 1.2 抵抗力
• 1.3 培养特性
• 1.4 生化特性
• 1.5 血清型
• 1.6 致病性
• 2 致病机理
• 3 流行病学
• 3.1 易感动物
• 3.2 传染源及传播途径
• 3.3 发病日龄
• 3.4 发病季节及发病情况
• 3.5 与其他疾病的关系
• 4 临床类型及病理变化
• 4.1 死胚和弱雏
• 4.2 败血型
• 4.3 心包炎、肝周炎和气囊炎
• 4.4 输卵管炎和卵黄性腹膜炎
• 4.5 关节炎或足垫肿
• 4.6 眼炎
• 4.7 鸡大肠杆菌肉芽肿
• 4.8 皮肤病变
• 4.9 大肠杆菌性脑病
• 5 常见病理组织变化
• 6 诊断
• 6.1 临床诊断
• 6.2 病原学诊断
• 7 防治策略
• 7.1 把好鸡苗关
• 7.2 加强鸡舍卫生消毒
• 7.3 加强环境控制,净化鸡群内环境
• 7.4 疫苗接种及疫苗的研究动态
• 7.5 加强病毒性疾病的预防
• 7.6 药物防治
• 第二章 鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 病料
• 1.1.2 实验试剂
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 细菌分离培养及纯化
• 1.2.2 革兰氏染色镜检
• 1.2.3 生理生化鉴定
• 1.2.4 血清型鉴定
• 1.2.5 致病性试验
• 1.2.6 药敏试验
• 2 试验结果
• 2.1 细菌分离结果
• 2.2 培养特性及形态特征
• 2.3 生理生化鉴定
• 2.4 血清型鉴定
• 2.5 致病性实验
• 2.6 药敏试验结果
• 3 讨论
• 3.1 血清型分析
• 3.2 致病性试验
• 3.3 耐药性分析
• 4 小结
• 4.1 血清型调查
• 4.2 禽源大肠杆菌耐药性研究
• 第三章 鸡致病性大肠杆菌主要毒力因子的PCR检测
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 菌株
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 酶与试剂
• 1.1.4 仪器
• 1.1.5 引物
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 大肠杆菌基因组DNA的制备
• 1.2.2 目的基因的PCR扩增
• 1.2.3 PCR产物琼脂糖凝胶电泳
• 2 试验结果
• 2.1 毒力基因PCR扩增结果
• 2.2 高致病性大肠杆菌毒力基因的检测率
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第四章 大肠杆菌病防制试验研究
• 1 材料
• 1.1 菌苗预防试验
• 1.1.1 菌种
• 1.1.2 培养基与试剂
• 1.1.3 试验动物
• 1.2 中西药结合防治试验
• 1.2.1 中草药"菌消散"
• 1.2.2 抗菌药物
• 1.2.3 试验动物
• 2 方法
• 2.1 菌苗预防试验
• 2.1.1 菌种培养
• 2.1.2 灭活
• 2.1.3 菌苗的制备
• 2.1.4 安全性检验
• 2.1.5 接种免疫
• 2.1.6 免疫效果检验
• 2.2 中西药结合防制试验
• 3 试验结果
• 3.1 菌苗预防试验
• 3.2 中西药结合防制试验
• 4 讨论
• 5 本章小结
• 结论
• 参考文献