茄子根际拮抗细菌的筛选鉴定及培养条件研究

论文摘要

茄子是人们喜爱而又熟悉的农作物之一,在全国拥有很大的种植面积,但近年来茄子病害的发生严重的影响了茄子的产量及质量,同时也造成了极大的经济损失。目前采取的防治措施主要依靠化学农药,但长期施用化学农药必将对环境造成污染。因此,生物防治在茄子的病害防治中就显得尤为重要。本实验筛得的拮抗细菌可以有效对抗几种茄子病害。从济宁接庄试验田健康茄子植株根际土壤中分离细菌,用平板对峙法经过初筛和复筛得到33株对茄子3种病原菌(茄子灰霉病,茄子枯叶病I,茄子枯叶病II)均有拮抗效果的细菌。根据这33株细菌抑菌效果的明显程度结合抑菌圈直径以及拮抗作用的稳定性、遗传性,最后保留3株拮抗菌。通过传统的形态学观察,生理生化鉴定及16S rDNA序列测序,将所测结果与EMBL/ BankIT/ DDBJ资料库中相关模式菌株的16S rDNA全序列进行聚类比较,得到系统发育树状图,综合鉴定结果为:Q47(1)、Q69为枯草芽孢杆菌,Q17(2)为短小芽孢杆菌。其中菌株Q47(1)的综合拮抗效果极其明显且作用稳定,并且它的抑菌谱非常广,可对除三种供试病原菌外的数10种植物病原菌均有极强的抑制作用,抑菌直径平均在10mm左右,是一株真正的具有广谱抑菌性质的优良拮抗菌,因此对Q47(1)的培养条件进行了初步研究。通过对Q47(1)的培养条件的研究表明:32℃,pH=7,持续光照、震荡培养72h为最适培养条件,此时菌体有最大生长量,通过研究其最适生长条件也为今后的发酵工作打下基础,提供有利依据。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 茄子及其病害的研究现状
• 1.1.1 茄子
• 1.1.2 茄子主要病害及其防治情况
• 1.2 目前应用的拮抗细菌主要种类
• 1.2.1 芽孢杆菌属
• 1.2.2 假单胞杆菌属
• 1.2.3 土壤放射杆菌属
• 1.2.4 其他一些细菌
• 1.3 拮抗细菌产生拮抗物质的种类
• 1.3.1 细菌素类物质
• 1.3.2 抗生素及次生代谢物
• 1.4 拮抗细菌的抑菌机理及抑菌结果
• 1.4.1 拮抗细菌的抑菌机理
• 1.4.2 抑菌结果
• 1.5 利用拮抗细菌进行生物防治的发展趋势
• 1.6 本研究的目的和意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 主要试剂、药品
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.1.4 主要培养基
• 2.2 方法
• 2.2.1 健康植株根际细菌的分离
• 2.2.2 健康植株根际土壤细菌的纯化
• 2.2.3 平板对峙实验筛选拮抗细菌
• 2.2.4 拮抗菌的鉴定
• 2.2.5 优良拮抗菌株 Q47（1）的培养条件研究
• 2.2.6 优良拮抗菌 Q47（1）的广谱抑菌性研究
• 第3章 结果与分析
• 3.1 健康植株根际土壤细菌的分离
• 3.2 健康植株根际土壤细菌的纯化
• 3.3 平板对峙实验筛选拮抗细菌
• 3.3.1 拮抗菌的初筛结果
• 3.3.2 拮抗菌的复筛结果
• 3.4 六株拮抗菌的鉴定结果
• 3.4.1 菌体形态特征
• 3.4.2 菌落形态特征
• 3.4.4 六株拮抗菌的生理生化反应测定结果
• 3.4.5 拮抗菌的分子鉴定结果
• 3.5 优良拮抗菌株Q47（1）的培养条件研究
• 3.5.1 不同培养时间下 Q47（1）的生长情况
• 3.5.2 不同培养方式下 Q47（1）的生长情况
• 3.5.3 不同光照方式下 Q47（1）的生长情况
• 3.5.4 不同温度下 Q47（1）的生长情况
• 3.5.5 不同pH 值下 Q47（1）的生长情况
• 3.5.6 Q47（1）生长曲线测定结果
• 3.6 优良拮抗菌株Q47（1）的广谱抑菌性研究
• 第4章 讨论
• 4.1 关于拮抗菌筛选和筛选方法的讨论
• 4.2 关于枯草芽孢杆菌广谱抗菌性的讨论
• 4.3 关于生防策略的讨论
• 第5章 结论
• 参考文献
• 致谢