论文摘要
目的：巨噬细胞吞噬大量氧化低密度脂蛋白转变为泡沫细胞，是动脉粥样硬化形成的早期关键病理变化。核转录因子-κB（NF-κB）介导的信号转导通路在动脉粥样硬化发生发展过程中具有重要的调控作用。本课题通过研究当归补血汤对氧化低密度脂蛋白诱导的RAW264.7细胞中NF-κB表达的影响，探讨当归补血汤抗动脉粥样硬化作用的细胞信号转导调控机制。方法：1．制备当归补血汤含药血清、氧化低密度脂蛋白；台盼兰染色法检测细胞活性；MTT法检测兔含药血清、无药血清对细胞存活率的影响。2．免疫组化法检测NF-κBp65的表达。3．免疫印迹法检测NF-κBp65的蛋白活性变化。4．实时荧光定量PCR法检测NF-κBp65mRNA的表达。结果：1．细胞培养3～4h后开始贴壁生长，2～3天后，细胞汇合成单层。台盼蓝染色细胞活力＞95％，可用于实验。兔含药血清、无药血清对细胞有营养作用促进其生长，但浓度过高会产生一定的细胞毒作用，在各剂量组中10％浓度对细胞影响较小。2．免疫组化检测结果显示：阳性染色物为棕黄色颗粒，位于胞浆或胞核中。阳性对照组（Ox-LDL组）细胞浆或核内可见大量棕黄色颗粒，阴性对照组中细胞浆或核内均无表达，空白对照组中棕黄色颗粒较少，这些结果说明用100μg／mlOx-LDL刺激RAW264.7细胞4h后，NF-κBp65表达明显增强。PAR组细胞中棕黄色颗粒较少，说明PAR可明显抑制NF-κBp65的表达。在三个含药血清剂量组中，高剂量组细胞中棕黄色颗粒最少，且比Ox-LDL组少，说明当归补血汤可下调经Ox-LDL刺激后RAW264.7细胞中NF-κBp65的表达量，以高剂量含药血清作用最明显，因此，在三个剂量组中选择高剂量含药血清组进行之后的实验。3．免疫印迹检测结果显示：Ox-LDL组蛋白条带灰度比值为1.2883±0.0139，与空白对照组（0.5894±0.0117）比较差异有显著性意义（P＜0.01），说明Ox-LDL刺激RAW264.7细胞后NF-κBp65蛋白活性明显增强；抑制剂PAR组（0.7713±0.0211）与Ox-LDL组比较差异显著（P＜0.01），说明PAR对NF-κBp65蛋白活性有明显的抑制作用；含药血清组（0.9189±0.0153），与Ox-LDL组比较有差异（P＜0.05），说明当归补血汤含药血清能下调NF-κBp65的蛋白活性。4．实时荧光定量PCR检测结果显示：Ox-LDL组mRNA表达量（0.007870±0.0024918），与空白对照组（0.002637±0.0014726）比较有显著差异（P＜0.05），说明Ox-LDL刺激RAW264.7细胞后NF-κBp65mRNA表达增强。PAR组（0.004706±0.0010521）、含药血清组（0.005335±0.0009869）分别与Ox-LDL组比较均有显著差异（P＜0.05）。说明PAR对NF-κBp65的mRNA表达有明显抑制作用，当归补血汤含药血清能下调NF-κBp65mRNA的表达。结论：100μg／ml的Ox-LDL刺激RAW264.7细胞4h后，能明显激活NF-κB通路，增强NF-κBp65的蛋白活性，提高NF-κBp65的基因表达；PAR对NF-κBp65活化具有明显抑制作用；当归补血汤一定程度上能减少NF-κBp65的活化量，下调其基因表达。推测当归补血汤可能通过调节该通路以调控相关致炎因子的表达进而影响As的发生发展，阻断NF-κB信号转导通路可能是当归补血汤抗As损伤作用的机制之一。
论文目录
相关论文文献
- [1].NF-κB在膝关节骨性关节炎治疗中的应用研究进展[J]. 按摩与康复医学 2015(12)
- [2].外周血单个核细胞NF-κB活性与急性缺血性脑卒中的相关性研究[J]. 心脑血管病防治 2019(06)
- [3].中药阻断NF-κB信号通路抑制Ⅰ型单纯疱疹病毒感染的研究进展[J]. 中国医药导报 2020(01)
- [4].蛋白酶体抑制剂通过NF-κB通路对急性肾损伤的保护作用[J]. 临床泌尿外科杂志 2020(01)
- [5].NF-κB在糖尿病视网膜病变中的研究进展[J]. 中医临床研究 2020(07)
- [6].NF-κB信号通路在人羊膜间充质干细胞治疗宫腔粘连中的作用[J]. 第三军医大学学报 2020(11)
- [7].金黄色葡萄球菌通过NF-κB信号对破骨细胞分化的影响及作用[J]. 基因组学与应用生物学 2020(04)
- [8].香兰素通过NF-κB信号通路抑制巨噬细胞活化的作用研究[J]. 黑龙江八一农垦大学学报 2020(04)
- [9].冬凌草甲素抑制T细胞核因子κB(NF-κB)通路减轻小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎症状[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2020(06)
- [10].NF-κB介导的炎症通路与消化道肿瘤相关研究进展[J]. 智慧健康 2020(24)
- [11].NF-κB和EGFR在前列腺癌中的表达及临床意义[J]. 江西医药 2016(12)
- [12].NF-κB对大肠癌发生发展的影响及其相关治疗的研究现状[J]. 实用肿瘤学杂志 2017(01)
- [13].硼替佐米对人脐动脉血管平滑肌细胞NF-κB的影响[J]. 医学研究杂志 2017(01)
- [14].NF-κB对非酒精性脂肪性肝病发病过程的影响[J]. 中南大学学报(医学版) 2017(04)
- [15].NF-κB与肝脏缺血再灌注损伤的研究进展[J]. 中国现代普通外科进展 2017(04)
- [16].NF-κB、HIF-1α及其在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的研究进展[J]. 贵州医药 2017(06)
- [17].NF-κB信号通路在乳腺癌发生及发展中作用的研究进展[J]. 同济大学学报(医学版) 2017(03)
- [18].染料木黄酮对氨诱导的星形胶质细胞NF-κB活化的影响[J]. 中国病理生理杂志 2017(09)
- [19].NF-κB参与调控细胞凋亡[J]. 上海交通大学学报(医学版) 2017(10)
- [20].紫菀酮基于NF-κB信号通路的体外抗炎机制研究[J]. 中华中医药杂志 2016(04)
- [21].二冬膏抗NF-κB抑制介导的人肺癌细胞效应探讨[J]. 中国实验方剂学杂志 2016(08)
- [22].NF-κB在初治急性髓系白血病中的表达与意义[J]. 江西医药 2016(08)
- [23].狼疮肾炎患者外周血单个核细胞NF-κB的表达及其意义[J]. 中国麻风皮肤病杂志 2009(04)
- [24].急性期川崎病患儿外周血单个核细胞NF-κB、MMP-9表达变化及意义[J]. 山东医药 2015(06)
- [25].NF-κB在细胞凋亡中调节作用的研究进展[J]. 中国药理学与毒理学杂志 2015(02)
- [26].益气活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织中NF-κB表达的影响[J]. 中药药理与临床 2015(02)
- [27].胎盘早剥患者外周血单个核细胞中NF-κB的表达研究[J]. 同济大学学报(医学版) 2015(02)
- [28].NF-κB与多发性骨髓瘤[J]. 南通大学学报(医学版) 2015(03)
- [29].NF-κB在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义[J]. 微生物学杂志 2015(03)
- [30].血糖波动和NF-κB与糖尿病大鼠肾脏病变的关系[J]. 现代预防医学 2015(19)
标签：当归补血汤论文; 动脉粥样硬化论文; 核转录因子论文; 氧化低密度脂蛋白论文; 细胞论文;