论文摘要
目的：观察SDS和NaOH复合消蚀法制备的胎儿无细胞真皮基质（acellular dermal matrix,ADM）的组织相容性，以及VEGF165对ADM的血管化的影响。为进一步改良真皮支架提供实验依据。 方法：采用足月胎儿皮肤，将皮肤切成4×5cm，经1M高渗NaCl溶液浸泡24小时，除去表皮，再先后用0.5％SDS和4％NaOH溶液各消蚀10个小时，其间用超声波清洗仪间断振荡以除去细胞碎片，制成ADM。取ADM，常规脱水，石蜡包埋及切片，HE染色，观察ADM的一般结构和细胞成分的残留情况。取2×2cm制备好的ADM，用冰冻切片机将其制成厚约为300μm放入溶有青霉素的PBS中4℃保存待用。选用重约300克的SD雄性大鼠45只，随机分为ADM包埋组、ADM加rAAV／LacZ组和ADM加rAAV／VEGF165组，每组15只。采用背部切口，切口大小为2.5×2.5cm。分别将ADM或ADM+rAAV／LacZ或ADM+rAAV／VEGF165包埋于真皮和皮肌之间，然后缝合、包扎。术后2，4，6周分别取材，每组5只。所取标本用Bouin液固定，脱水，包埋，切片后作如下处理：1．HE染色；2．以VEGF165，MMP-1，TIMP-1的单克隆抗体进行免疫组织化学染色，检测三种蛋白质在移植后的皮肤中的表达情况。观察并比较各组中ADM血管密度。进行图象处理和统计学分析。通过以上的观察分析，比较不同组之间血管化情况和愈合情况。
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