论文摘要
内向整流钾通道（Kir）在控制膜兴奋性中起到很重要的作用,抑制Kir 可使细胞膜产生去极化进而提高膜的兴奋性。Kir2.3 作为其中的一员,表达在多种组织,例如中枢神经系统,心脏和肾脏。现已发现Kir2.3 的功能可受多种细胞内外分子的调节,如Mg2+,多胺,质子,蛋白激酶C（PKC）等。因为很多细胞外信号分子都是通过激活PKC 作用于钾通道,所以了解PKC对于钾通道的调节作用机制很重要。已知PKC是一超家族,存在有很多亚型,但对PKC 亚型在Kir 通道调节中所起的作用所知甚少。本实验目的是了解α、β和ε等PKC 亚型在调节Kir2.3 通道中的作用。本实验以非洲爪蟾卵母细胞为表达系统,用双电极电压钳记录表达于爪蟾卵母细胞的全细胞Kir2.3 电流,采用特异的蛋白激酶亚型抑制剂--多肽,研究α、β和ε亚型的PKC 在调节Kir2.3 通道中作用。我们发现εPKC 短肽抑制剂可部分阻断PMA 对Kir2.3的抑制,而α和βPKC 短肽抑制剂却不能阻断该抑制作用。第一部分:在非洲爪蟾卵母细胞中表达Kir2.3 通道目的:在非洲爪蟾卵母细胞中表达内向整流钾离子通道。研究内向整流性钾离子通道的电生理特性。方法:（1） cRNA 的体外转录:Kir2.3 通道克隆到质粒载体pGEMHE 中,其序列经测序验证。用适当的限制性内切酶将质粒线性化后,用RibomaxTM Large Scale RNA Production Systems-SP6 and T7 Kit 体外转录得Kir2.3 的
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