论文题目: 羊栖菜褐藻糖胶的提取纯化和结构研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 食品科学
作者: 李波
导师: 许时婴
关键词: 羊栖菜,褐藻糖胶,褐藻,多糖,提取,结构,抗凝血
文献来源: 江南大学
发表年度: 2005
论文摘要: 羊栖菜属褐藻门马尾藻科植物,营养价值高,既能食用又能药用,是我国的特色海藻,资源十分丰富。羊栖菜褐藻糖胶是一种含岩藻糖的硫酸酯杂多糖,具有多样的生理功能,是羊栖菜中重要的生物活性物质。目前国内对羊栖菜褐藻糖胶的研究很少,且不够深入。本论文对采自浙江洞头县的羊栖菜中褐藻糖胶的提取纯化方法、结构以及抗凝血活性进行了研究,结果如下: 分析了原料羊栖菜粉的化学组成:水分12.2%,灰分15.4%,蛋白质12.3%,粗脂肪1.6%,粗纤维40.4%。羊栖菜多糖的组成为:褐藻胶28.4%,褐藻糖胶8.1%,褐藻淀粉0.5%。 比较了酸提法和水提法的提取效果及其对褐藻糖胶大分子结构的影响,结果表明酸提法和水提法各有优缺点:酸提法提取效率高,但会使褐藻糖胶发生部分水解,水提法提取效率低,但能保持褐藻糖胶大分子的结构。酸提法粗多糖宜选择乙醇分级沉淀法进行纯化,水提法粗多糖宜采用CaCl2法进行纯化。 羊栖菜褐藻糖胶的化学组成为:岩藻糖18-20%,糖醛酸12-19%,硫酸根11-13%,灰分24-34%,中性糖以岩藻糖、半乳糖和甘露糖为主,其次是葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖,金属元素主要是K、Ca、Na。 对水提法褐藻糖胶的分级纯化和物化性质进行了研究。水提法褐藻糖胶经DEAE Sepharose CL-6B柱层析得F1、F2和F3三个级分,F3又经Sepharose CL-6B柱层析得F31、F32和F33三个级分,凝胶过滤色谱和琼脂糖凝胶电泳显示F31、F32和F33为均一组分。 化学组成分析表明,F1、F2、F31、F32、F33均为岩藻糖、半乳糖和甘露糖等糖基组成的杂多糖,并含硫酸基、糖醛酸以及少量的蛋白质。其中,岩藻糖含量为18-33%,糖醛酸含量13-32%,硫酸基含量3-24%,蛋白质含量1-2%,相对分子质量范围26 kDa-959kDa。F32和水提法褐藻糖胶中的糖醛酸主要由葡萄糖醛酸和少量的甘露糖醛酸构成,而F33中甘露糖醛酸的比例较高。F33含有2%的N元素,氨基酸分析、核酸酶解和紫外扫描暗示这些N可能来自核酸。红外光谱分析表明,F31、F32和F33的糖苷键类型以α为主,并有少量的β-糖苷键。旋光性分析也表明,F32和F33中的岩藻糖主要是α-L构型。
论文目录:
缩写
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 羊栖菜的研究现状
1.1.1 羊栖菜的形态特征
1.1.2 羊栖菜的化学组成
1.1.3 羊栖菜的药用价值
1.1.4 食品加工
1.2 褐藻糖胶的研究现状
1.2.1 褐藻糖胶的化学组成和结构
1.2.2 褐藻糖胶的生物活性功能
1.2.3 褐藻糖胶的国内研究现状
1.3 本课题的立题背景和意义
1.4 本论文研究的主要内容
参考文献
第二章 羊栖菜褐藻糖胶的提取和纯化
2.1 前言
2.2 材料与设备
2.3 实验方法
2.4 结果与讨论
2.4.1 原料成分分析
2.4.2 羊栖菜褐藻糖胶的提取
2.4.2.1 酸提法和水提法
2.4.2.2 提取方法对褐藻糖胶分子结构的影响
2.4.3 羊栖菜褐藻糖胶的纯化
2.4.3.1 酸提法粗多糖的纯化
2.4.3.2 水提法粗多糖的纯化
2.4.4 羊栖菜褐藻糖胶的化学组成
2.4.4.1 化学组成
2.4.4.2 单糖组成
2.4.4.3 灰分及金属元素含量
2.5 本章小结
参考文献
第三章 羊栖菜褐藻糖胶的分级纯化和组分分析
3.1 前言
3.2 材料与设备
3.3 实验方法
3.4 结果与讨论
3.4.1 羊栖菜褐藻糖胶的分级纯化
3.4.1.1 褐藻糖胶的初步分级
3.4.1.2 褐藻糖胶F3的分级纯化
3.4.2 纯度鉴定
3.4.2.1 凝胶过滤法
3.4.2.2 琼脂糖凝胶电泳法
3.4.3 相对分子质量
3.4.4 化学组成
3.4.4.1 中性糖组成
3.4.4.2 苯酚-硫酸法测定总糖含量
3.4.4.3 岩藻糖、糖醛酸、硫酸基和蛋白质含量
3.4.4.4 氨基己糖含量
3.4.4.5 F32和F33级分的元素分析
3.4.4.6 F33的氨基酸组成
3.4.5 糖醛酸组成
3.4.5.1 羧基还原气相色谱法
3.4.5.2 离子色谱法
3.4.5.3 讨论
3.4.6 红外光谱分析
3.4.7 旋光性分析
3.5 本章小结
参考文献
第四章 羊栖菜褐藻糖胶F32的结构分析
4.1 前言
4.2 材料与设备
4.3 实验方法
4.4 结果与讨论
4.4.1 高碘酸氧化
4.4.2 Smith降解
4.4.3 脱硫
4.4.4 难溶于DMSO多糖的甲基化方法研究
4.4.4.1 含糖醛酸的多糖在DMSO中的溶解性
4.4.4.2 甲基化方法的比较
4.4.4.3 甲基化产物的分析
4.4.5 部分酸水解
4.4.6 DSF32-JL0.5的结构分析
4.4.6.1 DSF32-JL0.5的单糖组成
4.4.6.2 DSF32-JL0.5的甲基化分析
4.4.6.3 DSF32-JL0.5的NMR分析
4.4.7 DSF32-JL0.1的结构分析
4.4.7.1 DSF32-JL0.1的单糖组成
4.4.7.2 DSF32-JL0.1的甲基化分析
4.4.8 DSF32-JL0.03的结构分析
4.4.8.1 DSF32-JL0.03的单糖组成
4.4.8.2 DSF32-JL0.03的甲基化分析
4.4.9 DSF32的结构分析
4.4.9.1 DSF32的单糖组成
4.4.9.2 DSF32的甲基化分析
4.4.10 F32的结构分析
4.4.10.1 硫酸基位置的确定
4.4.10.2 糖残基构型的确定
4.4.10.3 F32的结构
4.4.11 F32的糖肽键特征
4.5 本章小结
参考文献
第五章 DSF32部分酸水解小分子产物的结构分析
5.1 前言
5.2 材料与设备
5.3 实验方法
5.4 结果与讨论
5.4.1 中性糖与酸性糖的分离
5.4.2 小分子产物的HPLC分离
5.4.3 LC／MS分析
5.4.4 甲基化分析
5.4.5 讨论
5.5 本章小结
参考文献
第六章 羊栖菜褐藻糖胶抗凝血活性的研究
6.1 前言
6.2 材料与设备
6.3 实验方法
6.4 结果与讨论
6.4.1 羊栖菜褐藻糖胶的体外抗凝血活性
6.4.1.1 褐藻糖胶样品的化学组成和相对分子质量
6.4.1.2 APTT和TT检测结果
6.4.1.3 结果分析
6.4.2 羊栖菜褐藻糖胶抗凝血活性的构效关系
6.4.3 小鼠抗凝血实验
6.4.3.1 羊栖菜褐藻糖胶对小鼠凝血时间的影响
6.4.3.2 羊栖菜褐藻糖胶对小鼠出血时间的影响
6.5 本章小结
参考文献
主要结论
论文创新点
攻读博士学位期间发表的论文
致谢
发布时间: 2006-07-20
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