论文摘要
背景及研究目的:逼尿肌不稳定（DI）是膀胱功能障碍中最常见的类型,临床发生率较高,发病机理尚未阐明,治疗效果不理想,因此对逼尿肌的功能调节以及DI的发病机制进行深入研究尤其具有科学意义和指导价值。目前Rho/Rho激酶信号转导途径对Ca2+致敏效应的调节及其在心血管异常平滑肌收缩类疾病的研究中受到极大的关注,并对这类疾病的治疗产生了极大的影响。Rho/Rho激酶信号转导途径所介导的Ca2+致敏效应是激动剂作用于细胞膜受体,膜受体活化使Rho蛋白活化,活化的Rho蛋白激活Rho激酶,Rho激酶通过抑制肌球蛋白磷酸酶（MLCP）的活性使MLCP对肌球蛋白轻链（MLC）去磷酸化作用降低,间接升高MLC磷酸化水平,增强平滑肌收缩。Ca2+致敏效应是一种非Ca22+依赖调节平滑肌收缩机制。目前研究显示Ca2+信号传导通路与DI发生密切相关,但这种非Ca2+依赖调节平滑肌收缩的Ca2+致敏效应是否参与了DI发生,尚不清楚。本研究通过体外肌条拉力实验观察Rho激酶抑制剂对逼尿肌收缩功能的影响,并采用RT-PCR方法进一步检测正常及DI大鼠膀胱组织Rho激酶亚型ROCKⅠ和ROCKⅡmRNA的表达,观察DI时Rho激酶亚型表达变化:初步探讨Rho激酶在膀胱收缩功能调节中的作用及其与逼尿肌不稳定的关系,为临床治疗逼尿肌不稳定提供新的思路。 材料及方法:采用膀胱颈尿道结扎引起膀胱流出道部分梗阻建立DI大鼠模型,以同龄假手术组大鼠作对照,充盈性膀胱测压筛选实验动物;离体逼尿肌肌条机械牵拉并予Rho激酶特异选择性抑制剂Y-27632进行干预,观察正常逼尿肌和不稳定逼尿肌兴奋性、收缩性的改变;应用RT-PCR方法检测正常及DI大鼠膀胱组织Rho激酶亚型mRNA表达,观察DI时Rho激酶各亚型表达变化。 结果:（1）充盈性膀胱测压结果显示:DI模型制作成功率为74.19%,正常大鼠膀胱测压曲线平滑,膀胱容量及压力正常;DI组大鼠膀胱测压曲线呈不稳定收缩波,膀胱容量及压力增加明显,顺应性增高,具有统计学意义。（2）离体逼尿肌肌条实验证实:在一定前负荷下,正常逼尿肌和DI逼尿肌均出现自发性收缩,DI出现自发性收缩的频率和收缩力明显高于正常组（P<0.01）;Rho激酶抑制剂Y-27632（3μM/L）可以显著降低DI组膀胱的自发性收缩频率和自发性收缩张力（P<0.01）,正常对照组无明显影
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