论文摘要
为了从基因组整体水平评价CpG岛甲基化的改变在肿瘤发生发展和转移中的作用,寻找癌组织特异性及转移特异性的甲基化谱标志物,本研究首次联合运用甲基化敏感的限制性指纹技术（MSRF）和变性高效液相色谱（DHPLC）检测法,以乳腺癌和结直肠癌作为代表,分别比较分析了31例乳腺癌与癌旁组织、15例结直肠癌与癌旁组织以及15例具有相同病理类型和分化程度,但不同转移风险的结直肠癌组织的基因组CpG岛甲基化谱。我们首先利用对照细胞系从36对随机引物中筛选出10对特异性高、重复性好、符合本研究需要的MSRF引物,然后利用MSRF-DHPLC,检测上述组织标本。我们发现利用58、67两对随机引物和18、67两对随机引物的组合,可以分别检测出83.9%（26/31）的乳腺癌组织和93.3%（14/15）的结直肠癌组织发生了特异性的甲基化谱改变,而且在两种类型的肿瘤标本中,甲基化谱的改变均以高甲基化为主。另外,乳腺癌组织基因组甲基化谱的改变与患者的年龄、病理类型、肿瘤大小、组织分级等临床资料无关。不同转移风险的结直肠癌组织具有相似的甲基化谱,两组不同转移风险的结直肠癌组织发生异常高甲基化的频率在其中一对引物的检测中有差别。我们的实验结果表明:（1）肿瘤基因组CpG岛甲基化的改变以高甲基化为主;（2）基因组CpG岛的高甲基化改变独立于乳腺癌发展过程的多项临床指标,可能发生于肿瘤形成的早期,参与肿瘤的发生;（3）相同病理类型和分化程度结直肠癌的原发肿瘤,其转移潜能可能比较接近,不同的转移风险是肿瘤与机体相互作用、不断演进的结果;（4）结直肠癌原发肿瘤组织CpG岛甲基化谱不能特异性地反映肿瘤的转移风险。我们将在大样本中进一步证实上述结论。
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