丹参多糖的提取和结构表征、抗氧化活性评价

论文摘要

丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）是唇形科（Lamiaceae）鼠尾草属（Salvia Linn.）多年生草本植物,以其根及根茎入药,它主要应用于治疗心血管疾病。目前国内外对丹参的开发利用主要集中在水溶性酚酸类和脂溶性二萜醌类等小分子化合物上,而对大分子物质多糖的研究尚处于起步阶段。本文以丹参为材料,分别采用热水浸提法、超声法、碱提法和酶法四种提取方法对其中的多糖进行了提取,并对这四种不同方法所提丹参多糖进行结构表征及抗氧化活性评价,以期为丹参多糖的开发利用提供科学依据。主要研究结果如下：1.采用石油醚和乙醇回流脱脂,热水浸提法、超声法、碱提法和酶解法四种方法提取丹参中的多糖,提取液经Sevag试剂除蛋白,透析去除小分子物质,最后真空干燥得热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖。2.热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖的理化性质分析结果表明,热水浸提多糖和超声提取多糖的理化指标一致,与碱提多糖和酶提多糖之间差异较明显。3.扫描电镜观察结果表明,热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖的形貌特征差别显著,超声提取法、碱提法和酶解法比传统的热水浸提法更有利于丹参多糖从细胞内溶出,它们的溶出效果顺序为：碱提多糖>超声提取多糖>酶提多糖>热水浸提多糖。4.红外光谱分析结果表明,热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖都具有多糖的一般特征吸收峰,红外光谱基本吻合,主要官能团没有显著差异,均为β-吡喃糖。另外,所提丹参多糖中存在结合蛋白和硫酸基。5.氨基酸分析结果表明,热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖的氨基酸成分和含量有差别。碱提多糖含有16种必须氨基酸和非必须氨基酸（缬氨酸未检出）,其余三种多糖均含有17种必须氨基酸和非必须氨基酸。热水浸提多糖、超声多糖、碱提多糖和酶提多糖的氨基酸含量分别为11.02%、16.87%、3.23%和4.85%,其中必须氨基酸分别为4.16%、6.71%、0.78%和1.60%。其中,超声提取多糖在氨基酸含量和必须氨基酸含量两个指标均处于最高,碱提多糖两个指标最低。6.抗氧化活性评价表明,热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖均有一定的抗氧化活性。在4.0 mg/mL的样品浓度下,热水浸提多糖、超声提取多糖、碱提多糖和酶提多糖对DPPH自由基清除率的最大值分别为84.09%、83.73%、37.34%和82.23%；在0.40 mg/mL的样品浓度下,对超氧阴离子自由基清除率的最大值分别为86.72%、89.45%、76.80%和81.91%；在0.40 mg/mL的样品浓度下,对羟基自由基清除率最大值分别为42.89%、93.58%、25.20%和47.90%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 多糖的研究进展
• 1.1.1 多糖概述
• 1.1.2 多糖的基本性质
• 1.1.3 多糖的提取、分离、纯化、含量测定和结构分析
• 1.1.4 多糖的生物活性
• 1.1.5 多糖的未来发展趋势
• 1.2 丹参及其多糖的研究概况
• 1.2.1 活性成分
• 1.2.2 药理作用
• 1.2.3 丹参多糖的提取
• 1.2.4 丹参多糖的药理活性
• 2 立题依据
• 3 材料与仪器
• 3.1 丹参
• 3.2 试剂
• 3.3 仪器设备
• 4 研究方法
• 4.1 四种提取方法提取丹参多糖
• 4.2 丹参多糖的理化性质分析
• 4.3 丹参多糖的电镜扫描观察
• 4.4 丹参多糖的红外光谱扫描
• 4.5 丹参多糖的氨基酸分析
• 4.6 丹参多糖对DPPH自由基清除活性的测定
• 4.6.1 反应溶液的配制
• 4.6.2 DPPH溶液吸收光谱的测定
• 4.6.3 DPPH溶液稳定性的分析
• 4.6.4 多糖清除DPPH自由基活性的测定
• 4.7 丹参多糖对超氧阴离子自由基清除活性的评价
• 4.7.1 反应溶液的配制
• 4.7.2 超氧阴离子体系吸收光谱的测定
• 4.7.3 超氧阴离子体系稳定性的分析
• 4.7.4 多糖清除超氧阴离子自由基活性的测定
• 4.8 丹参多糖对羟基自由基清除活性的评价
• 4.8.1 反应溶液的配置
• 4.8.2 羟基自由基体系吸收光谱的测定
• 4.8.3 羟基自由基体系稳定性的分析
• 4.8.4 多糖清除羟基自由基活性的测定
• 5 结果与分析
• 5.1 理化性质
• 5.2 扫描电镜
• 5.3 红外光谱
• 5.3.1 热水浸提丹参多糖
• 5.3.2 超声提取丹参多糖
• 5.3.3 碱提取丹参多糖
• 5.3.4 酶提取丹参多糖
• 5.4 氨基酸组成与含量
• 5.5 四种不同方法所提丹参多糖清除DPPH自由基活性的研究
• 5.5.1 DPPH溶液的全波长扫描图
• 5.5.2 DPPH溶液的稳定性研究
• 5.5.3 四种不同方法所提丹参多糖清除DPPH自由基活性的比较
• 5.6 四种不同方法所提丹参多糖清除超氧阴离子自由基活性的研究
• 5.6.1 超氧阴离子体系的全波长扫描图
• 5.6.2 超氧阴离子体系的稳定性研究
• 5.6.3 四种不同方法所提丹参多糖清除超氧阴离子自由基活性的比较
• 5.7 四种不同方法所提丹参多糖清除羟基自由基活性的研究
• 5.7.1 羟基自由基体系的全波长扫描图
• 5.7.2 羟基自由基体系的稳定性研究
• 5.7.3 四种不同方法所提丹参多糖清除羟基自由基活性的比较
• 6 讨论
• 6.1 关于四种不同提取方法的比较
• 6.2 关于丹参多糖结构表征的分析
• 6.3 关于不同抗氧化评价方法的比较
• 6.4 关于丹参多糖对自由基清除能力的分析
• 7 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的学术论文