STR-PCR在唐氏综合征诊断中的应用

论文摘要

目的:唐氏综合征（Down syndrome,DS）又称21三体综合征,是一种最常见的先天性染色体数目畸变,发病率高达0.13%,给家庭和社会带来沉重的负担。目前临床应用的染色体核型分析方法因检测周期长、技术难度大、成本高,不适合在普通实验室开展,不能应用于大规模的临床筛查,故迫切需要一种快速、准确的方法对唐氏综合征患者进行快速诊断,为产前基因诊断、降低患儿出生率奠定基础。方法:选择21号染色体上唐氏综合征关键区域（DSCR）内部及附近的8个具有高杂合度的短串联重复序列（D21S1411、D21S1413、D21S1414、D21S1432、D21S1437、D21S1446、D21S1270、D21S2054）,结合聚合酶链反应,以及单链构象多态性进行分析。从97个可疑染色体疾病的无关个体采集外周抗凝血,经盐析法提取基因组DNA,扩增上述8个基因座,通过聚丙烯酰胺凝胶、银染,所有凝胶均经凝胶成像系统分析。同时,所有标本均进行染色体核型分析。结果:1、不同个体在某一STR基因座的电泳结果可出现以下4种情况之一:①、只出现一条DNA深带,为一纯合子;②、出现两条DNA带,密度比接近1:1,为正常杂合子;③、出现两条DNA带,密度比接近2:1,为可疑唐氏综合征患者;④、出现三条DNA带,密度比接近1:1:1,可确诊为唐氏综合征患者。2、97例患者中经STR-PCR分析,40例确诊为唐氏综合征,与染色体核型分析结果一致。3、经统计分析,8个STR基因座的杂合度均在75%以上,多态信息量均在50%以上。结论:1、本研究选用的21号染色体上的8个STR基因座,经统计学分析,符合Hardy-Weinberg平衡定律,具有高度的多态性,可作为良好的遗传标记,8个基因座均可见典型三体带型。2、用STR-PCR技术检测21号染色体上的8个STR基因座的等位基因来诊断经典型和易位型唐氏综合征患者,本研究中与核型分析相比,准确性达100%。该方法对于诊断比例低于30%的嵌合体有待于进一步研究。3、本研究方法因无需细胞培养,所以检测过程简便、迅速,具有极好的临床应用价值。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 对象和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 常见非整倍体疾病的分子生物学诊断
• 综述参考文献
• 致谢