慢性胃炎脾虚证患者基因差异表达图谱研究

论文摘要

研究背景和目的 20世纪50年代中期,一批名老中医分别撰文,全面阐述和介绍了辨证论治体系,确立了辨证论治在整个中医诊疗体系中的特殊地位。证在中医理论中的独特性和重要性得到了学术界的认同。随之,对证候的研究、证本质的研究开始进行。到70年代中期,证本质研究进入了全面铺开的时期。进入80年代后,研究逐步深入,如血瘀证、脾虚证、肾虚证等研究都进行得比较广泛。 脾虚证作为中医证侯研究中一个有代表性的领域,一直是中西医结合研究的热门课题之一,被列入国家“七五”重点攻关项目和军队“七五”攻关课题。已进行的研究以消化系统为主,涉及免疫、能量代谢、肌肉运动、神经系统、内分泌、甚至基因水平等方面,取得了一定成就。 中医理论认为脾主运化,运化水谷精微和水湿,脾主统血,脾为气血生化之源,脾为后夭之本,四季脾旺不受邪,脾主思,脾主四肢肌肉,开窍于口,其华在唇等。脾的生理功能所涉及的广泛性,就表明了脾的病理也不会局限于一病一症一脏器。同时,脾与五脏六腑的关系,“内伤脾胃,百病由生”等,说明脾胃损伤会引起很多疾病的发生,脾病会引起很多脏器系统的病变,而很多疾病、脏器病变也会引起脾病的发生。因此,脾虚证涉及的面也相当广泛。它可以出现在内、外、妇、儿、肿瘤、皮肤、耳鼻喉、老年病等各科疾病中;它本身可以涉及到消化系统、神经系统、免疫系统、肌肉运动系统、内分泌系统、能量代谢系统等各个系统的方面的变化。对于这样一个庞杂的体系,无序的研究只会造成混乱。任何单一方面的检测指标也都只能反映宏观概念中的一部分或某一点,而不可能是证的全部。 为了使对脾虚证的研究进行的有序而深入,并最终形成一个综合的轮廓,有必要采用病与证相结合的研究方法。在理论认识和已有的研究中,脾虚证可以出现在多个系统多种疾病的病变中,但一般以消化系统功能紊乱为主要表现的观点得到大多数研究者的认同,而慢性胃炎是消化系统最常见的疾病,慢性胃炎患者有相当大的比例(有报道为1/3左右)可表现为脾虚。因此,我们的研究把范围限定在慢性胃炎脾虚证,从而使研究的切入点更加明确,在临床病例的入选上也更加容易确定和甄别。 在已有的众多参考指标中,从分子层面进行揭示的不多,深入到基因水平的更少。

论文目录

• 引言
• 第一部分 文献综述
• 一、中医证侯研究进展
• 1、证本质各家学说
• 2、肾虚证研究
• 3、血瘀证研究
• 4、肺气虚证研究
• 5、血虚证研究
• 6、脾虚证研究
• 7、证本质研究的特点与存在问题
• 8、证侯研究的新思路
• 参考文献
• 二、脾虚证研究进展和思考
• 1 脾的生理功能
• 2 脾虚证本质认识
• 3 脾虚证规范化诊断的确立
• 4 脾虚证试验和临床研究
• 4.1 脾虚证消化吸收功能方面
• 4.2 消化道病理改变方面
• 4.3 脾虚证病理基础方面
• 4.4 胃肠运动方面
• 4.5 免疫功能方面
• 4.6 脾虚证其他方面
• 5 脾虚证研究存在的问题
• 参考文献
• 三、慢性胃炎研究进展
• 1、慢性胃炎与Hp感染
• 2、Hp感染慢性胃炎与胃癌癌前病变
• 3、Hp感染慢性胃炎与中医分型
• 4、慢性胃炎与胃动力障碍
• 5、慢性胃炎消化吸收功能研究
• 6、慢性胃炎胃粘膜病理生理研究
• 7、慢性浅表性胃炎其他相关研究
• 8、新的研究设想
• 参考文献
• 四、疾病差异表达基因研究进展
• 1、疾病发病机制方面
• 2、疾病诊断方面
• 3、疾病治疗作用机制方面
• 4、其他方面
• 参考文献
• 第二部分 研究背景和假说
• 一、研究背景
• 二、工作假说
• 第三部分 实验研究
• 一、实验设计
• 二、研究方法
• 三、技术路线
• 四、实验内容
• 1、材料与方法
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器与设备
• 1.3 病例选择
• 1.4 胃粘膜采集
• 1.5 总RNA提取
• 1.6 探针标记与杂交
• 1.7 洗片
• 1.8 荧光扫描
• 1.9 芯片分析
• 2.0 Real time PCR
• 2、结果
• 2.1 临床一般资料
• 2.2 胃粘膜组织病理学观察
• 2.3 RNA质量
• 2.4 芯片扫描和分析
• 2.4.1 Ratio值分析
• 2.4.2 聚类分析
• 2.4.3 对第一组和第二组筛选出的差异表达基因的比对
• 2.4.4 t-test分析
• 2.4.5 专业知识分析
• 2.4.6 Realtime PCR分析
• 3、讨论
• 1、慢性胃炎脾虚证与正常健康人的基因差异表达比较
• 2、慢性胃炎脾虚证和脾胃湿热证的基因差异表达比较
• 3、入选病例临床资料
• 4、慢性胃炎不同证型之间所共有的基因
• 5、芯片结果与荧光定量PCR检验结果的复合度
• 6、脾虚小鼠基因差异表达初步实验研究
• 7、本研究工作的一点思考
• 五、结论
• 致谢